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高速逆流色谱分离黄柏中的小檗碱和巴马亭
【来源/作者】奥科官网 【更新日期】2014-4-26 21:36:22

1实验部分

1.1仪器与试剂

HSCCC2TBE300型高速逆流色谱仪,深圳同田生化有限公司;

HD2212C2B核酸蛋白检测仪,上海康华生化仪器厂;

R2201旋转蒸发器,上海申胜生物技术有限公司;

LC210AT高效液相色谱仪,日本岛津色谱仪器公司;

氯仿、甲醇、正丁醇、乙酸均为国产分析纯,水为重蒸水,黄柏购于杭州胡庆余堂,为川黄柏。

1.2样品的处理

把黄柏1000g粉碎过20目筛,用5倍量工业酒精浸泡24h,连续3次,过滤,合并滤液浓缩后加适量盐酸酸化至pH等于2,放置过夜,过滤得滤液,滤液再用NaOH碱化至pH等于10,然后用等量氯仿萃取3次,氯仿浓缩得浸膏3.2g,该浸膏用于高速逆流色谱分离的样品。

1.3HSCCC溶剂系统选择

溶剂系统参照文献[4,5]选择氯仿:甲醇:0.2molöl稀盐酸组成溶剂体系,按照各种比例混合,总体积为4ml,每次取样品10mg溶于溶剂体系,充分溶解后分层,取上下相分别点板(硅胶板,展开剂为:正丁醇∶乙酸∶水=7∶1∶2),看两相中斑点的大小,最后发现当氯仿∶甲醇∶0.2molöl稀盐酸的体积比为2∶1∶1时,斑点大小大约相等,所以选氯仿∶甲醇∶0.2molöl稀盐酸=2∶1∶1为溶剂体系。

2结果及讨论

2.1分离结果

溶剂体系为:氯仿∶甲醇:0.2molöl稀盐酸=2∶1∶1,将其室温下在分液漏斗中充分混合后静置分层(总体积1000ml),然后取上相为固定相,下相为移动相。每次进样200mg溶于20ml的溶剂系统上相,用注射器一次进样,流动相流速2mlömin,仪器转速800römin,检测器波长254nm,进样4h后,停止主机转动,用氮气把固定相推出,测得保留比为91.4%。

摘自:中国分析仪器网


【关键词】滤液, 川黄柏, 酒精, 奥科官网 

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