在柑橘果实发育过程中．会产生大量的生理落果。目前，对于这些落果的开发利用十分不足，仅有部分橙类的幼果被称为枳实，作为中药使用，而占我国柑橘产量55％以上的宽皮柑橘，如温州蜜柑、桠柑的生理落果未得到充分的利用。研究表明．多数橙类幼果中含有的辛弗林、橙皮苷等活性成分，在升压、抗氧化、清除自由基、抑菌等方面有着重要的生理作用，以前主要作为中药原料使用。

近年来，辛弗林被认为具有潜在的减肥功效而受到青睐，以植物提取物的形式进入美国等西方国家，因此对于原料的市场需求大增。对于柑橘落果中活性成分的传统提取方法主要有水提法、有机溶剂提取法，均可将落果中的两类活性成分同时提取出来．将其分离提纯，工艺繁琐。超临界CO萃取技术作为一种新型分离技术，具有工艺简单、安全无污染等优点．并可通过改变工艺条件，针对性地对原料中活性成分进行提取。

本文以柑橘落果为原料，对超临界CO萃取其活性成分辛弗林的工艺进行研究，为柑橘落果资源的利用提供新的工艺路线。

1材料与方法

1．1材料与试剂

试验原料为湖南石门收集的柑橘落果，主要为温州蜜柑，晒干后再经40qc烘干24h，使其水分含量一致，充分混匀后经粉碎机粉碎、筛分后备用，其辛弗林含量为1．04％；食品级CO(纯度大于99．5％)；辛弗林对照品(中国药品生物制品检定所，批号0727—200105)；橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号0721—200010)；甲醇、乙腈为色谱纯；无水乙醇、十二烷基磺酸钠、磷酸为分析纯。

1．2仪器与设备

HA221—40—48型超临界萃取装置，江苏南通华安超临界萃取有限公司生产；Agilent1100高效液相色谱仪；RE一52AA旋转蒸发仪：9FQ一28型锤式粉碎机；DK一$24恒温水浴锅。

1．3方法

1．3．1超临界CO萃取柑橘落果中辛弗林的单因素试验影响超临界CO萃取效果的因素主要有原料颗粒度、萃取压力、萃取温度、夹带剂用量、流体流量、萃取时间等。根据试验设备的操作条件以及相关参考文献，确定各单因素试验条件范围，每次试验称取100g柑橘落果粉末，装入萃取装置1L萃取釜中进行提取，具体试验安排如下：

1)原料颗粒度对于萃取的影响在萃取温度50℃、萃取压力30MPa、流体流量12L·h～、夹带剂(乙醇)用量10％、萃取时间5h条件下，考察柑橘落果<20目、2030目、30～40目、40～50目、50～60目、60～70目的不同颗粒度对于辛弗林提取率的影响。

2)萃取温度对于萃取的影响以5O～60目的柑橘落果粉末为原料，在萃取压力30MPa、流体流量12L／h、夹带剂(乙醇)用量10％、萃取时间5h条件下，考察不同的萃取温度35、40、45、50、55、6O℃，对于辛弗林提取率的影响。

3)萃取压力对于萃取的影响以50～60目的柑橘落果粉末为原料，在萃取温度50℃、流体流量12L／h、夹带剂(乙醇)用量10％、萃取时间5h条件下，考察不同的萃取压力15、20、25、30、35、40MPa对于辛弗林提取率的影响.

4)流体流量对于萃取的影响以5O60目的柑橘落果粉末为原料，在萃取温度50℃、萃取压力30MPa、夹带剂(乙醇)用量10％、萃取时间5h条件下，考察不同的流体流量2、4…6810、12L／h对于辛弗林提取率的影响。

5)夹带剂用量对于萃取的影响以5O～6O目的柑橘落果粉末为原料，在萃取温度50℃、萃取压力30MPa、流体流量12L／h、萃取时间5h条件下，考察不同的夹带剂(乙醇)用量2、4、6、8、10、12％对于辛弗林提取率的影响。

6)萃取时间对于萃取的影响以5O60目的柑橘落果粉末为原料，在萃取温度5O℃、萃取压力30MPa、流体流量12L／h、夹带剂(乙醇)用量10％条件下，考察不同的萃取时问1、2、3…456h对于辛弗林提取率的影响。

1．3．2超临界CO萃取工艺的优化在单因素试验的基础上，选择了对工艺影响较大的萃取温度、萃取压力、流体流量、夹带剂用量四因素，采用正交试验设计进行超临界CO萃取柑橘落果辛弗林工艺的优化。选用L9(3)正交表安排试验，具体因素水平见表1，在设计条件下萃取5h，以辛弗林的提取率为考察指标，试验重复3次，取平均值，采用极差分析法确定最优工艺条件，并进行最优条件下的验证试验。