陈皮(即橘皮)为芸香科植物橘及其栽培变种的成熟果皮。陈皮主要含有橙皮苷、辛弗林等成分。其中辛弗林具有抗氧化、抑菌、收缩血管、升高血压的药理作用，广泛应用于医药、食品行业。文献报道的测定辛弗林含量的方法有高效液相色谱法(HPLC)、薄层扫描法(TLC)、毛细管电泳法(CE)、反相高效液相色谱法(ＲP－HPLC)等。

研究表明辛弗林具有较强的荧光性质，目前还未见用三维荧光光谱技术结合化学计量学二阶校正方法来测定陈皮中辛弗林含量的文献报道。该方法以“数学分离”代替“化学或物理分离”，解决了复杂体系中未知干扰物与分析物光谱重叠所引起的难分辨问题，实现了陈皮中辛弗林含量的直接快速定量测定，同时采用高效液相色谱法对该方法进行了验证。

2方法和原理

2．1三线性模型

三线性模型是朗伯比尔定律的扩展，利用三维荧光进行分析时，其表达式如下:xijk=ΣNn=1ainbjnckn+eijki=1，．．．I;J=1，．．．，J;k=1，．．．K(1)其中，xijk是大小为I×J×K的三维数据阵X中的元素;ain是大小为I×N的相对激发光谱阵A中的元素;bjn是大小为J×N的相对发射光谱阵B中的元素;ckn是大小为K×N的相对浓度阵C中的元素;eijk是大小为I×J×K的三维残差阵E中的元素;N表示主因子数，包括实际对荧光有贡献的组分数和背景干扰因子数。

2．2交替三线性分解(ATLD)方法

交替三线性分解(ATLD)算法根据以下式子对A，B，C进行迭代求解:aT(i)=diagm(B+Xi．．(CT)+(i=1，．．．，I)(2)bT(j)=diagm(C+Xj．．(AT)+(j=1，．．．，J)(3)cT(k)=diagm(A+X．．k(BT)+(k=1，．．．，K)(4)

2．3荧光组分数的确定

要解三线性模型，必须知道主因子数N，只有当N大于等于体系真实的荧光组分数时，ATLD算法才能得到具有实际物理意义的解。本实验采用核一致诊断法对体系的组分数进行了估计。

3实验部分

3．1试剂和仪器

试剂:辛弗林储备液:精密称取0．00255g的辛弗林标准品(购于成都曼斯特生物科技有限公司)用色谱纯的甲醇配成102μg/ml的储备液。辛弗林标准液:取5ml储备液至50ml容量瓶中，二次水定容后摇匀。中药陈皮储备液:将中药陈皮(购于石家庄乐仁堂大药房)粉碎(60目)，称取1．0000g用色谱纯的甲醇溶解超声2h(100Hz)，冷却至室温后过滤定容到50ml容量瓶中。陈皮待测液:取2．5ml陈皮储备液至25ml容量瓶中，二次水定容后摇匀。pH=7．0的BＲ缓冲溶液:0．04mol/L;氯化钠溶液:1．0mol/L;甲醇:色谱纯。仪器:F－4600荧光分光光度计(日本日立公司，用1cm石英比色皿扫描激发－发射三维荧光光谱)，U－3010紫外－可见分光光度计(日本日立公司，用1cm石英比色皿扫描紫外吸光光谱)。

3．2实验方法

在一系列10ml容量瓶中分别加入2ml缓冲溶液，1mlNaCl溶液，不同体积的辛弗林标准溶液或陈皮待测液及一定量的甲醇，用二次水定容后摇匀。测定三维荧光时，激发波长范围200～320nm，发射波长范围250～370nm，波长间隔5nm，狭缝宽度设置为5．0/5．0nm，扫描速度为1200nm/min。同时测定200nm－370nm波长范围内各个样品的紫外吸收光谱，用于校正三维荧光强度，校正公式如下:I0=I*100．5*b(Aex+Aem)其中，L0是校正后的荧光强度;I是校正前的荧光强度;Aex和Aem分别是激发和发射波长处的吸光度;b是比色皿厚度。