点击接通在线客服
食品中毒鼠强的气相色谱-质谱分析测定(三)
【来源/作者】周世红 【更新日期】2018-11-04

(2)取中毒患者的呕吐物(样品2)20g置于50mL离心管中,4000r/min离心5min,取其上清液倒人100mL分液漏斗中以20mL、10mL二氯甲烷提取两次,离心管中固形物移到研钵中加无水硫酸钠研磨至无结块,倒入250mL磨口瓶中加20mL二氯甲烷超声提取10min,过滤,合并呕吐物上清液的二氯甲烷提取液和固形物的二氯甲烷提取液,作为中毒患者的呕吐物样品提取液,以无水硫酸钠脱水后,氮吹至1.0mL,转移至进样瓶中。

(3)分别取八宝粥原料:大米(样品3)、红小豆(样品4)、绿豆(样品5)、江米(样品6)、豇豆(样品7)、大枣(样品8)各20g分别置于6个250mL磨曰瓶中各加20mL二氯甲烷超声提取10min,过滤,用无水硫酸钠脱水后,分别氮吹至0.5mL,转移至进样瓶中,待气相色谱-质谱分析。

结果与讨论:(1)在采集的剩余八宝粥(样品1)提取液中检测出毒鼠强;在中毒患者的呕吐物(样品2)提取液中检测出毒鼠强;在各种八宝粥原料:大米(样品3)、红小豆(样品4)、绿豆(样品5)、江米(样品6)、豇豆(样品7)、大枣(样品8)的提取液中均未检测出毒鼠强。

(2)在NIST库、NIST/EPA库和Wiley库中,均没有毒鼠强的标准质谱图,首先需要将购买的毒鼠强标准溶液稀释至1.Oμg/mL,按照上述仪器条件进样,采集毒鼠强的全扫描质谱图,输入工作站,创建自己的标准谱库,为以后的中毒样品定性检索使用,毒鼠强的基峰是优/z 212(100%),分子离子峰是m/z 240(是基峰的60%),定量离子选择m/z 212,定性离子选择m/z 240和m/z 132(是基峰的20%)。毒鼠强标准的总离子流图见图3—1,毒鼠强标准品的全扫描质谱图见图3—2。

(3)毒鼠强的分析测定没有国家标准检验方法,首先需要建立分析方法并进行方法学确认,通过查阅相关文献资料:毒鼠强分子式为C4H8N4O4S2,相对分子质量是240,为环状有机氮化合物,是弱极性化合物,易溶于乙酸乙酯、二氯甲烷、苯、环己烷等有机溶剂,微溶于水。在样品提取溶剂选择方面,分别采用乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷对100 mL水中加入1.Oμg毒鼠强标准进行提取效率即回收率试验(n=6),结果表明几种溶剂对于毒鼠强的提取效率无显著差异:乙酸乙酯81.2%、甲醇71.5%、二氯甲烷78.9%,由于二氯甲烷溶剂沸点为40℃、乙酸乙酯为77℃、甲醇为65℃,二氯甲烷溶剂沸点最低、易挥发、浓缩时需要时间短,分析测定的总的时间就可以加快,对中毒应急检测最有利,因此选择二氯甲烷作为提取溶剂。测定使用弱极性毛细管柱DB-5MS,色谱柱温度采用程序升温方式,不分流进样。标准品购自公安部有关部门(100μg/mL),用二氯甲烷稀释配制成标准系列O.01μg/mL、O.05μg/mL、0.10μg/mL、O.50μg/mL、1.Oμg/mL,方法的线性范围为0.01~1.Oμg/mL,y=511930x-27097(r=O.9997),按毒鼠强峰高3倍噪音时,标准溶液可测定为0.003g/mL,为检出限。按毒鼠强峰高10倍噪音时,标准溶液可测定为0.01μg/mL,为定量限。线性范围、检出限、定量限均满足了常见毒鼠强中毒样品的测定要求。

将毒鼠强标准溶液按照上述条件进样分析,得到毒鼠强的保留时间,在中毒样品毒鼠强测定方法的质谱采集方法时间段中,在其保留时间士1min时间段内设定为SIM采集方式:采集m/z 132、m/z 212、优/z 240,这样可提高检测的灵敏度,以基峰m/z 212作为定量离子,其余优/z 212、m/z 240为定性离子,其余时间段是全扫描采集方式,如果样品提取液中有其他化合物,可以采集其全扫描质谱图,进行NlST标准谱库检索。

(4)样品前处理是主要问题,采集的剩余八宝粥样品比较黏稠,直接液液萃取很难分层而且容易乳化,导致八宝粥的提取可能不完全,离心后分别处理,萃取效率提高,合并提取液,作为剩余八宝粥样品的提取液。中毒患者呕吐物的处理同八宝粥,离心后分别进行液液萃取和液固提取,萃取效率提高,合并提取液,作为中毒患者呕吐物样品的提取液。各种八宝粥原料的提取相对比较简单,因为其原料是日常一直使用的,前期并未发生中毒情况,所以不需要研磨粉碎,只需检测表面是否含有中毒物即可。

(5)质量控制:在样品提取液进样前必须进二氯甲烷溶剂,以确认进样针和气相色谱-质谱仪器系统未受到污染;取20mL二氯甲烷氮吹至0.5mL,转移至进样瓶中,按照上述气相色谱-质谱条件进样lμL分析,总离子流图在毒鼠强保留时间处没有出现3倍噪音以上峰,以确保提取溶剂在浓缩时不会因溶剂中微量杂质浓缩而对毒鼠强测定产生干扰。样品的定性一是保留时间与毒鼠强标准的保留时间一致;二是样品中的毒鼠强的质谱图与毒鼠强标准的质谱图比对m/z 212是基峰、丰度为100%,m/z 240丰度是基峰的60%,允许偏差在±10%内,m/z 132丰度是基峰的20%,允许偏差在±20%内,基本符合比例要求;三是样品中的毒鼠强的色谱峰形与毒鼠强标准的色谱峰形一致。

参考资料:气相色谱-质谱在仪器安全监测中的应用

相关链接:

食品中毒鼠强的气相色谱-质谱分析测定(一)

食品中毒鼠强的气相色谱-质谱分析测定(二)


【关键词】食品,毒鼠强,气相色谱-质谱,国家标准物质网 

<< 上一篇:食品检测的内容

>> 下一篇:食品中一般成分的检测技术之水分的测定(一)