1引言

婴幼儿配方奶粉是以母乳为标准，含有满足婴幼儿正常的营养需求的成分和含量，它是以牛奶为基础全面升级改造的奶制品。大部分的奶粉企业根据婴幼儿不同月龄成长的营养需要，调节了必需亚油酸、微量元素、蛋白质、糖类等营养素的比例促进婴儿快速发育成长。

维生素是人体所必需的六大营养素的一种，是维持人体正常机能的主要成分，同时也是促进婴幼儿健康成长不可或缺的部分,但过量的维生素摄人也会对婴幼儿造成毒害作用，所以在婴幼儿配方奶粉中维生素的添加用量是至关重要的。因此，食品安全国家标准中关于婴幼儿配方奶粉中的叶酸、泛酸、生物素、维生素B12含量检测的相关标准有着重要作用，它不仅是企业生产所参考的准则，更是从事食品安全工作人员在监督工作中的主要参考依据。

现行标准中，微生物检验有着较高的精确性，但在检验工作中存在的局限性(重复性差、检验周期长等）也有待改进〜叱乳粉中维生素含量的现行标准是通过各自标准菌生长来测定，这也就意味着测定所用接种的标准菌活性和数量，对检验工作意义重大，所以对标准菌生长状态研究是不可缺少的。聂炎炎等在检测生物素含量时，将活化的标准菌冻存于孔板中，减少传代接种时菌不利状态对检测的影响，但没有对冻存前标准菌培养条件进一步研究。周敏等在检测生物素含量时，使用已经包被好标准菌的微孔板试剂盒来减少接种不利影响，但试剂盒的储存条件对标准菌活性有较大影响。由此可以得知，标准菌接种状态对后续维生素检验有着重要影响。

本研究中，标准菌培养不同时间后，通过紫外分光光度计测定分析得到生长曲线，来选择标准菌最佳接种时期,因为对数期菌活性最高，避免出现之后稳定期和衰亡期死菌影响读数情况，并通过对生长曲线的研究，减少因培养时间过长导致菌活性和数量下降，从而带来的不利接种状态对后续维生素检验工作的造成准确性差和重现性差等影响，以期在一定程度上解决维生素检验时间周期长的问题。

2材料与方法

2.1材料与试剂

菌株：莱士曼氏乳酸杆菌(维生素B12标准菌)ATCC7830、鼠李糖乳杆菌(叶酸标准菌)ATCC7469、植物乳杆菌(生物素标准菌、泛酸标准菌)ATCC8014标准菌种(中国工业微生物菌种保藏中心)。培养基；乳酸杆菌琼脂培养基、乳酸杆菌肉汤培养基、叶酸测定培养基(北京陆桥生物技术有限责任公司)。试剂；叶酸标准品(纯度大于99%,美国Sigma公司);氢氧化钠(分析纯，天津市永大化学试剂有限公司)；乙醇(分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司)。

2.2仪器与设备

ME204/02电子分析天平为(上海梅特勒-托利多公司);l-15pk离心机(美国Sigma公司);MIR-2S4低温恒温培养箱(河北万铭通达科技有限公司)；UV-2700紫外分光光度仪(日本岛津公司)。