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荧光素酶（luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的总称，其中最有代表性的是从甲虫中分离得到的萤火虫荧光素酶和从海肾中分离得到的海肾荧光素酶。萤光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶，一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶，同时在所有的化学发光反应中，它的光产物具有最高的量子效率，检测灵敏度高。荧光素酶报告基因被广泛用于miRNA靶基因验证。
Dual Luciferase双荧光素酶报告基因检测，在细胞中能够同时检测两种不同荧光素酶的活性，萤火虫（Photinus pyralis）萤光素酶和海肾（Renilla reniformis）萤光素酶。其中Photinus pyralis作为报告基因反应目的基因表达的改变，Renilla reniformis作为内参基因。首先用FFL试剂测定了萤火虫荧光素酶的光信号，接下来，将RL试剂添加到同一个孔中。RL试剂终止萤火虫荧光素酶的光信号并引发海肾荧光素酶反应。这两种反应的光信号强度可以在光度计上测量。
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