纳氏试剂法

1 方法：

取50mL 比色管中水样50mL，取7比色管，加入氨水标准溶液，体积50mL，溶解度：0，0.02，0.05，0.10、0.50、1.00、2.00mg/L，向水样中加入110mL，用1mL 酒石酸钠溶液和搅拌器将标准试管中加入1mL，在420nm 波长下搅拌10min。

用纯水作为对照测定1cm试管的吸光度。

2 影响因素分析 ：

（1）纳氏试剂分光光度法测定水中氨氮的试验结果容易受到外来氨的影响。有很多的氨污染来源 ：

一个是空气污染，所以为了避免氨在空气中的影响，使氨受到环境的污染，并在洁净的实验室进行实验。

其次，对实验用水和设备进行污染。因此，实验用水应无氨水，使用前应用水冲洗实验容器。

第三，实验冲击和污染，使用氯化汞代替碘化汞试剂空白值可降低实验结果，酒石酸钾含有高氨氮，无工艺影响测量灵敏度，空白值高。酒石酸钠溶液的含量可以用氢氧化钠溶解在所需的体积中，然后通过加热煮沸，直到其不含氨或氨，而与容量是否达到所需的尺寸无关。

（2）将其置于国家标准方法的棕色玻璃瓶中密封，避光保存，试剂的pH 为11.8~12.8。在约2个月后，瓶中出现强碱，严重腐蚀的玻璃瓶，产生棕色鳞片状沉淀物，严重影响了纳氏试剂的有效期和实验结果的重现性和敏感性。

为了提高纳氏试剂在储存过程中的稳定性，使用聚乙烯塑料瓶代替玻璃瓶密封使其远离光。现在，在储存12个月后，纳氏试剂在聚乙烯塑料瓶中仍然是透明的。每月测量标准曲线，线性相关系数在 0.9999，斜率介于 0.201 7 和 0.211 0 之间。结果为19.97~20.25mg/L，误差范围为0.15%~1.25%，小于质控样品的不确定度（3%）。同时，模拟水和自来水的相对标准偏差为3.59%~9.41%。 （3）样品体积效应纳氏试剂中的汞可影响操作人员的健康，对环境造成污染。因此，在保证测试结果准确性的前提下，应尽量减少试剂的数量。采用了减小体积容量的方法。

样品测定的标准方法是将50mL 比色管的体积加入25mL 比色管中。当测量试剂和标准时，在国内和国外，样品在相应的工艺中减半。测定的标准实验方法。冲洗水（GB5749—2006）、纳氏试剂分光光度法、容量和对比50mL比色管25mL 比色管定容双色系统、氨氮含量线性范围为0~2mg/L，相关系数为0199 90~0199 99，具有良好的线性关系。 （4）显色时间、吸光度对氨氮的测定也有显著影响。在25℃条件下，在显色剂中加入0.05、0.5和100mg/l 的氨氮样品，测定其吸光度，并在不同时间加色于5min，吸光度值低，颜色稳定10~30min，最大吸光度值在40min 后逐渐褪色，吸光度值降低。因此，纳氏试剂分光度法测定水中氨氮应控制在10~30min。

纳斯尔试剂测定氨氮的其他影响因素也受pH值的影响。水中的氨氮非常不稳定。最好是在水样采集后立即测量。否则，应增加可靠的措施，如酸、冷冻、过滤和灭菌，以稳定样品。在测定样品时，加入纳氏显色剂后，水样的 pH 值应控制在11.8~12.8，pH 值小于11.8， pH>12.8，溶液浑浊，无法测定。在氨氮测定过程中，纳氏试剂也受到温度等因素的影响。温度的升高会加速显色反应。因此，在测定过程中，在氨氮含量为0~2mg 时，必须考虑上述各点。测量6次，重测6次。结果表明，相关系数在0.999~0.999之间，具有良好的线性关系。

3 结果：

通过讨论纳氏试剂分光度法测定水中氨氮的试验条件，指出应严格控制外氨对实验的影响。试验过程中应注意避免氨环境，注意试剂中的氨污染。试着扣减。在制备酒石酸钾钠溶液时，应加入氢氧化钠煮沸除去氨水。试验过程中，显色时间控制在10~30min， pH 控制在11.8~12.8之间，以保证检测的准确性。纳氏试剂瓶储存在传统的棕色玻璃瓶中，大约2个月后就会出现褐色鳞片沉淀，影响检测结果的重现性，储存在聚乙烯塑料瓶中， 12个月后仍未澄清，没有沉淀，因此纳氏试剂应用聚乙烯塑料瓶密封，以避免光的保存，这不仅保证了准确性和重复性，同时也有效地延长了纳氏试剂的贮存时间。

纳氏试剂分光度法，由于其简便、准确、灵敏等特点，常被认为是测定氨氮的首选方法。然而，在测定水中氨氮时，该方法易受外界因素的影响。

因此，选择合适的实验条件，有效地降低试剂的影响，是保证准确测量结果的关键。它还含有汞盐的有毒成分。纳氏试剂回收不当造成严重的环境污染。汞可以通过呼吸和皮肤接触进入人体，对人类健康构成严重威胁。因此，在保证试验结果准确性的前提下，努力控制和降低纳氏试剂的用量。年龄和环境保护对操作者的健康很重要。

为了减少纳氏试剂对人体的危害和对环境的污染，用容积法进行25m比色管试验。与50ml比色管相比，体积浓度为50mg/L NH4具有良好的线性关系。对0.1~2N模拟水样进行t检验，结果差异无显着性（P>0.0 5），有效地节约了试剂和药品的使用，减少了环境污染。