北方伟业计量集团有限公司
色谱柱寿命不理想的问题一直困扰着众多实验室的小伙伴们,针对自己使用色谱柱的寿命表现均低于它们的普遍寿命的情况,不少小伙伴纷纷表示其玻璃心不堪色谱柱年轻即逝的打击。对此,让我们一起去探究这其中的原因吧!
首先,我们要注意的是:
1、是否使用同填料保护柱(相同品牌);
2、流动相从配置到弃用在 12 小时以内;
3、流动相瓶子严格清洗干燥,密封;
4、滤头滤膜材质和品质是否选择错,注意查看是否使用后有溶解现象;
5、使用售后推荐的冲洗方式冲洗色谱柱。
分析原因:
1、色谱柱污染,导致的结果就是:
a、可能是由于样品在流动相中的溶解度低而沉淀出来的;
b、样品中有强保留物质(与键合相极性相似的物质);
c、样品或者流动相中与填料表面发生微弱的不可预知的化学反应;
d、通常这样的情况伴随柱压升高;或者柱压正常,一个色谱图中出现有些峰形异常,有些峰形正常的情况。
通常我们的解决方法
a、尽量从根源上解决问题,选择合适的样品前处理技术,去除掉强保留物质,获得更加“干净”更加成分单一的样品;
b、使用保护柱,保护柱的选择尽量与分析柱同等填料,同等键合方法的保护柱,如果使用不同填料、不同装填工艺的保护柱,在分离能力和保护方面可能得不到最好的效果,也不要使用更大粒径的保护柱,更大粒径或者装填较差的保护柱会因为它的峰展宽作用而导致分离能力下降。
2、流动相“脏”了
流动相在色谱柱中的使用量比样品要大得多,不停的冲刷色谱柱,如果流动相变质或者有其他的污染物,那对色谱柱的污染会比样品更大,色谱柱对流动相反而是一种净化,而且在运行梯度时,还会出现鬼峰。
这种情况下我们的解决方法
a、流动相配置后尽快使用,最多不超过 12 小时;
b、有机相和盐相混合的流动相,更容易导致盐的析出,尽量使用在线混合,且在运行梯度时变化速率不宜太快,避免盐析出;
c、用专业的经过钝化处理过的溶剂瓶装流动相,切忌不能使用塑料瓶,做好密封,在更换流动相的时候同时更换试剂瓶;
d、水在接触空气或者离开制水设备以后会出现变质,现配现用,打开后尽快使用。
小伙伴们,平时这些问题你们都注意到了吗!
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