北方伟业计量集团有限公司
准备：低密度的细胞培养皿一个，15ml无菌离心管，胰酶，新培养皿，完全培养基
步骤：①显微镜下观察传代4天后的细胞状态；
②转移至操作台内进行细胞传代，先用PBS清洗细胞碎片，加入2ml胰酶，显微镜下观察有细胞脱落或细胞皱缩时，吸走1.5ml胰酶，剩余0.5ml胰酶继续消化至细胞完全脱落皿底；
③终止消化后800rpm，离心3分钟；
④重悬细胞沉淀至新的培养皿中，额外添加5%胎牛血清后转移至培养箱内培养；
⑤过夜后观察细胞状态有无好转及观察细胞增殖现象。
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细胞传代培养未明显增值的原因有哪些？您的方法是针对哪个原因呢？