金黄色葡萄球菌检测在食品行业中至关重要。金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属，有“嗜肉菌"的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染。而对于金黄色葡萄球菌在速冻食品中的存在量，卫生部公布食品安全国家标准《速冻面米制品》，允许金葡菌限量存在，也对金黄色葡萄球菌检测做了相关规定。

实验设备耗材

  吸管(1ml、10ml)、恒温培养箱(36±1℃)、冰箱、均质器、振荡器、平皿、稀释瓶、天平、显微镜、接种棒等

培养基和试剂

  金黄色葡萄球菌检测需要用到试剂为：普通肉汤培养基、胰蛋白胨大豆肉汤、Baird-Prker琼脂平板、缓冲蛋白胨水(BP)、凝固酶试验冻干血浆

检验程序(非选择性增菌法)

  检样25g+225mlBP胨水

  10ml匀液+10ml双料胰胨肉汤

金黄色葡萄球菌检测操作步骤

  1.称取25g固体样品;吸取25mL液体样品，加入225mLBP胨水，固体样品研磨或置均质器中制成混悬液。

  2.吸取10mL上述混悬液，接种于10mL双料胰蛋白胨大豆肉汤中，置36±1℃培养2h。

  3.再加入20ml 含20%NaCl的单料胰蛋白胨大豆肉汤，置36±1℃培养24±2h。

  4.划线转种2个表面干燥的Baird-Parker琼脂平板上，36±1℃培养46±2h。

  5.挑取可疑菌落移种到肉汤培养基中，置36±1℃温箱培养24h。

  6.取肉汤培养物0.3ml同0.5ml凝固酶试验冻干血浆于8mm*100mm试管内充分混合，置36±1℃培养，定时观察是否有凝块形成，至少观察6h，以内容物完全凝固，使试管倒置或倾斜时不流动为阳性。试验中需同时做已知阳性和阴性对照。对可疑结果，应进行革兰氏染色、镜检和其他辅助试验。

  7.本菌为革兰氏阳性球菌，排列是葡萄球状，无芽胞，无荚膜，致病性葡萄球菌菌体较小，直径约为0.5～1μm。在Baird-Parker平板上为圆形、光滑凸起、湿润、直径为2～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落;但无混浊带及透明圈。

  8.报告结果，如发现有凝固酶试验阳性的菌落，即报告1g(ml)食品中有金黄色葡萄球菌存在，否则为阴性。