维生素C（VC）是维持人体正常生理代谢必需的一类有机化合物，具有提高机体免疫力、抗氧化等生理作用，但人体内不能合成VC，必须由食物供给。荠菜是十字花科植物，在我国分布广泛。作为一种药食同源植物，荠菜富含维生素、黄酮、多糖、多酚等生物活性成分，深受消费者的喜爱。VC具有强还原性，在空气中非常容易氧化，对热敏感。荠菜预处理过程中，由于长时间暴露在空气中，容易使样品中的VC损失，从而影响样品测定的准确度和精确度。

传统的VC提取是将样品在酸溶液中破碎，常温下浸提，提取时间长，VC容易受环境影响而损失。超声波提取是利用超声波的强烈空化效应、扰动效应，增加溶剂的穿透力，加速溶剂对目标提取物的提取进程，缩短提取时间。与传统的提取法相比，超声波提取法最大优点是提取时间缩短，目标提取物的损失降低。

目前超声波提取技术已逐渐应用于天然植物有效成分、生物活性成分的提取研究中。VC含量的测定方法一般包括滴定法、比色法、电化学法、荧光法等，这些方法所需试剂较多，操作繁琐，影响测定效率。而高效液相色谱法由于其高效、稳定、可靠等特点，被广泛应用于果蔬中维生素C含量的测定，特别是在分析大批量样品时，借助仪器的分析方法能更快更准确地进行含量测定。本研究建立了超声波提取荠菜中的VC，反相高效液相色谱测定VC含量的方法，为荠菜等蔬菜中维生素C含量的测定提供了试验资料。

1材料与方法

1.1材料与试剂

荠菜，江苏中宝食品有限公司提供。甲醇，色谱纯，国药集团化学试剂有限公司；VC，纯度逸99.0%，Sigma公司；草酸等试剂均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司；娃哈哈纯净水，杭州娃哈哈集团有限公司；0.45μm滤膜，国药集团化学试剂有限公司。

1.2仪器与设备

Waters高效液相色谱仪，Waters1525泵，Waters2489双通道紫外检测器；Breeze色谱系统管理工作站，色谱柱：Fortis-C18柱（250mm×4.6mm，5.0μm）；液相平头微量进样器（25μL）Eppendorf；HR2084食品制样器，飞利浦公司；隔膜真空泵，天津市腾达过滤器件厂；UV-1801紫外可见分光光度计，北京瑞利分析仪器有限公司；KQ2200超声清洗机，昆山市超声仪器有限公司；电子天平（精确度0.1mg），Sartorius公司；高速冷冻离心机（SL8R），Thermo公司。

1.3试验方法

1.3.1制备标准溶液

准确称量20.0mgVC标准品，用0.1%的草酸溶解，定容于100mL棕色容量瓶中，制成VC标准储备液，低温避光保存。量取5.00mLVC标准储备液，用0.1%的草酸定容于50mL棕色容量瓶中，制成VC标准工作液。再分别准确取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL的VC标准工作液于10mL棕色容量瓶中，用0.1%的草酸定容，制成浓度为2~20μg/mL的VC标准待测溶液。

1.3.2检测波长的选择

以0.1%的草酸溶液作为空白对照，用紫外分光光度计在230~400nm波长范围内扫描测定VC标准待测液（2~10μg/mL）的吸光度，依据最大吸收波长选择试验的检测波长。

1.3.3样品超声提取

准确称取100g去除黄叶的荠菜样品置于食品制样器中，加入100mL的1%草酸溶液，匀浆。准确称取5.00g匀浆样品放入50mL的离心管中，加入2%草酸40mL，置于超声波仪中提取，100W功率，25℃超声提取10min；4℃、9000r/min离心，上清液用0.1%的草酸溶液转移定容至50mL的棕色容量瓶中，制成待测液。待测液用0.45μm滤膜过滤后进行HPLC测定。