神经退行性疾病如阿尔茨海默病（Alzheimer'sdisease,AD）是以进行性记忆和认知功能减退为特征的慢性疾病。大量研究表明，AD患者大脑中神经元的变性是由于受到自由基损伤引起的氧化应激的增加从而产生细胞的功能障碍。

神经细胞保护的目的在于提高神经细胞对任何原因引起的内环境紊乱的耐受力与抵抗力，阻断神经细胞坏死的不同环节，使细胞在病理环境中的生存能力增强，促进神经细胞功能的恢复。在人体代谢的整个过程中，会产生各种类型的氧自由基代谢物，如过氧化氢、氢氧根、超氧化物阴离子自由基等，这些是细胞氧化应激的重要因素，而氧化应激很容易引起细胞产生毒性，并且是身体衰老以及许多重要疾病的诱导因素之一，大脑作为人体中重要的器官，其可在神经元中产生大量的氧自由基从而导致细胞毒性，细胞功能障碍甚至细胞的凋亡，这也说明了氧化应激损伤神经元在AD等神经退行性病变中具有重要的病因学意义。因此可以通过给以抗氧化剂抑制氧化损伤。

阿魏酸（FA）是存在于多种植物中的一种酚酸，其结构如图1所示，研究表明FA是当归、川茸、木贼、升麻等中药的主要成分之一，是一种天然的抗氧化剂，被认为是治疗神经退行性疾病特别是AD的潜在药物，其具有广泛的药理作用并已有大量的研究报道，FA具有明显的抗氧化作用，对自由基、过氧化亚硝基、亚硝酸盐有强烈的清除作用，能明显地抑制血小板凝集和血栓，抗菌消炎，抗肿瘤，抗突变，增强免疫等。药理研究表明FA对大鼠海马神经元损伤具有保护作用，但其对氧化应激损伤的神经元细胞保护作用的文献报道并不多，此外-PC12细胞在结构与功能上与神经元多有相似之处，加之较好培养。因此，本研究利用过氧化氢（H2O2）诱导PC12细胞氧化损伤模型，通过观察FA对比02致PC12的细胞损伤影响，探讨FA对H2O2致PC12细胞氧化损伤的神经保护作用。

1材料

1.1细胞

高分化的大鼠嗜锯瘤细胞（PC12细胞）由广州中医药大学三元里校区临床药理研究所提供。

1.2药物及试剂

FA（反式FA,批号H25M6L1,结构见图1）,白色粉末（相对分子质量为194.18）,纯度99.9%及30%比。2溶液均由上海源叶生物科技有限公司提供;高糖DMEM,胎牛血清，青霉素-链霉素，磷酸盐缓冲液（PBS）溶液（美国Gibco公司，批号分别为8118119,42F9470k,1881450,8118044）；嗟哩蓝（MTT,德国BioFRoxx公司，批号176451）；二甲基亚砚（DMSO），细胞培养级DMSO（广州瑞舒生物科技有限公司，批号分别为20171201-1,Q6949）；超氧化物歧化酶（SOD）,丙二醛（MDA）,乳酸脱氢酶（LDH）（南京建成生物工程研究所，批号分别为20180809,20180810,20180809）；trizol（美国Thermo公司，批号184601）；三氯甲烷、异丙醇、无水乙醇（广州紫金塘生物科技有限公司，批号分别为20170801,20170801,20180301-2）；PCR扩增试剂盒（广州塞拉芬生物科技有限公司，批号AI11351A）；胰岛素样生长因子-KIGF-1）兔多克隆抗体，辣根过氧化物酶（HRP）山羊抗兔多克隆二抗（美国Abeam公司，批号分别为ab9572,ab97051）;0-肌动蛋白（/3-actin）抗体（美国Affinity公司，批号AF7018）。

1.3仪器

HF90型二氧化碳培养箱（上海力申科学仪器有限公司）；SW-CJ-2D型单人单面超净工作台（苏州净化设备有限公司）；ECLISETS100型倒置显微镜（日本Nikon公司）；SB25-12DTD型超声仪（宁波新芝生物科技股份有限公司）；台式5702型低温离心机（德国Eppendorf公司）；XK96-3型微量振-荡器（江苏新康医疗器械有限公司）;ELxSOO型光吸收酶标仪（美国Bio-Tek公司）；超微量紫外分光光度计，梯度PCR仪（美国Thermo公司）；恒温水浴箱（上海恒科学仪器有限公司）;7500型实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-timePCR）仪（美国ABI公司）。