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全氯霉素是一种抑制性的广谱抗生素,可以抑制骨髓细胞中蛋白质的合成,对人类和动物的骨髓细胞和肝细胞具有毒性作用,不仅可引起细胞减少性贫血、血小板减少和再生障碍性贫血,还可导致严重的胃肠道反应、二重感染等。长期微量摄入氯霉素不仅使沙门氏菌、大肠杆菌等产生耐药性,还会导致机体正常菌群失调,使人们易患各种疾病。随着人们生活水平的提高,动物性食品的食用安全越来越受关注。
世界上很多国家都对其作出了规定,我国在农业部235号公告中也明确地将氯霉素列为禁用药物。目前监测氯霉素类药物残留的方法主要有高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法、超高效液相色谱-质谱联用法和酶联免疫法等。现有的氯霉素类药物检测方法前处理往往比较复杂,消耗试剂较多,检测周期长成本高。本研究建立了一种针对鸡肉中氯霉素的液相色谱—串联质谱的检测方法。
本方法减少试剂用量、改善提取液净化步骤,简单快捷、灵敏度高,可以检测市场上鸡肉中氯霉素的含量,对质量检测方法的进步和市民的身体健康有重大意义。
液相色谱—串联质谱仪:配有电喷雾离子源(ESI)(美国AgilentLC1290/Sciex5500);电子天平(感量0.01g、感量0.0001g)(梅特勒电子天平);高速离心机(美国sigma公司);固相萃取装置;超声波清洗仪;可控温氮吹浓缩仪;涡旋振荡器。
水符合GB/T6682规定的一级水;标准物质:氯霉素(氯霉素、氯霉素-D5)纯度≥99.6%,购自德国DR公司;试剂:甲醇(CH3OH)、乙腈(CH3CN)、甲酸(HCOOH),色谱纯:均购自德国默克公司;溶剂:乙腈水溶液:80%乙腈水+0.2%甲酸;甲醇水溶液:10%甲醇水+0.1%甲酸;滤膜:水相,0.22μm(上海安谱);PRIMEHLB(6cc200mg)固相萃取柱(美国Waters)。
标准储备液:每种标准物质均用甲醇配制成1.00mg·mL-1,在-18℃条件下于棕色瓶中保存,有效期为6个月。标准中间液(1.00μg·mL-1):将标准储备液用甲醇逐级稀释成1.00μg·mL-1标准中间溶液,在-18℃条件下于棕色瓶中保存,有效期为3个月。内标工作液(100ng·mL-1):准确吸取氯霉素-D5内标中间溶液1.0mL,用甲醇稀释并定容至10mL,在4℃条件下于棕色瓶中保存,有效期为3个月。标准工作液:根据药物的灵敏度和仪器线性范围,用乙腈水溶液配成不同浓度的混合标准工作溶液,现配现用。
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