随着人们生活水平的提高，饮料在日常生活中越来越重要。现在市面上的饮料品种繁多，颜色也各种各样。但是在饮料中大多添加了人工合成色素，由于长期食用会对人体健康产生一定的危害，食品安全国家标准《食品添加剂使用标准》对它们的使用范围和使用限量做出了严格规定，但个别企业没有认真执行，违规添加合成色素的现象屡见不鲜。因此，建立一种快速、准确、灵敏的测定食品中合成着色剂的方法势在必行。

诱惑红是一种水溶性人工合成食用色素，别名卜(4一磺基一3一甲基一6一甲氧基一苯偶氮)一2一萘酚二磺酸二钠、c小食用红色17号、FDC40号红色(美)、食用赤色40号，溶于水、甘油与丙二醇，微溶于乙醇，不溶于油脂。该色素稳定性优良，可安全地用于食品、饮料、药品、化妆品、饲料、烟草、玩具、食品包装材料等的着色。

诱惑红具有酸性染料的特性，目前，食品中诱惑红的国家标准测定方法为纸层析一分光光度，该法操作步骤烦琐，灵敏度、准确度难以保证。本文参考了有关文献，建立了反相C18柱分离，紫外梯度洗脱，254nm波长下检测的高效液相色谱诱惑红测定方法，该方法还可同时测定其他5种合成色素，结果令人满意。

1材料与方法

1．1仪器

大连伊利特高效液相色谱仪紫外检测器；AS230超声波清洗器(天津奥特)。

1．2试剂

1．2．1柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝标准：500mg／L，国家标准物质中心。

1．2．2诱惑红标准85％，中国生物制品鉴定所。诱惑红储备液：精确称取0．0589g诱惑红，用高纯水使其溶解，转移至100mL容量瓶中，定容至刻度，此溶液浓度为500mg／L。

1．2．3标准中间液分别吸取5．00mL(1．2．1)液和(1．2．4)液到50mL容量瓶中，用高纯水定容至刻度，此溶液含柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝、诱惑红浓度为50mg／L。

1．2．4标准工作液吸取1．00mL标准中间液(1．3．I．2)到50mL容量瓶中，用高纯水定容至刻度，此溶液含柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝、诱惑红浓度为1．00mg／L。其它试剂与GB／T5009．141—2003相同；本实验所用液体试剂均为HPLC级；实验用水均为超纯水(电阻率为18．2MQ．cm)。

1．3色谱条件

色谱柱KromailC18(4．6mill×250mmi．d．5In)不锈钢柱；柱温40℃、流速：1．0mL／min、波长：254／IITI；流动相A：0．02mol／L乙酸铵溶液(Ph=4)；流动相B：甲醇(色谱纯)；梯度洗脱条件见表1。

1．4样品处理

将样品加热除去二氧化碳后，称取10．0g样品于烧杯中，然后用20％柠檬酸调pH呈酸性，加入0．5g1．0g聚酰胺粉吸附色素，将吸附色素的聚酰胺粉全部转到漏斗中过滤，用pH4的酸性热水洗涤多次(约200mL)，以洗去糖等物质。若有天然色素，用甲醇一甲酸溶液洗涤3次，每次20mL，至洗液无色为止。再用70℃的热水多次洗涤至流出液为中性。洗涤过程必需充分搅拌，然后用乙醇一氨溶液分次解吸色素，收集全部解吸液，于水浴上使大量的乙醇和氨蒸发，蒸发至2mL左右时，取下冷却。用流动相定容至5mL，摇匀。用0．45m滤膜过滤，取10L进行HPLC分析。