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蜈蚣三七系毛莨科银莲花属植物林荫银莲花(AnemoneflaccidaFr.Schmidt)的根茎,别名地乌,性温,味辛、微苦,具有祛风湿、助筋骨、消肿止痛之功效,民间常用于风湿疼痛、跌打损伤。本室由蜈蚣三七中提取分离得到有效部位总皂苷,制成抗类风湿的中药新药,目前已进入临床研究阶段。
药效学试验和临床试验结果表明蜈蚣三七总皂苷具有良好的调节机体免疫功能的作用,具备高效、低毒的优势,应用前景广阔。蜈蚣三七总皂苷的有效成分之一:3-0一仅-L一吡喃鼠李糖B.D.吡喃木糖.齐墩果酸-28.O一仅一L.吡喃鼠李糖B—D.吡喃葡萄糖一B-D-吡喃葡萄糖苷,由Zhao等从蜈蚣三七中首次分离得到,定名为flaceidaⅡ,代号w,目前该化合物仅在植物林荫银莲花中发现。本室研究证实W在蜈蚣三七中含量最高,并探讨了其在动物体内的药代动力学过程。
本文比较了蜈蚣三七总皂苷、w及其苷元齐墩果酸对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,为寻找免疫活性成分和构效关系的研究提供依据。
蜈蚣三七采自湖北省五峰县,经湖北中医学院中药鉴定学教研室陈科力教授鉴定为林荫银莲花AnemoneflaccidaFr.Schmidt的根茎。齐墩果酸,由中国药品生物制品检定所提供;雷公藤片,每片含雷公藤甲素33g,三九黄石制药厂生产,批号:060401。W、齐墩果酸、蜈蚣三七总皂苷均按w计、雷公藤片按雷公藤甲素计,均以DMEM培养液配成所需浓度的溶液,经0.22m滤膜除菌后4℃保存备用。
昆明种小鼠,清洁Ⅱ级,雄雌各半,体重(20±2)g,由湖北省实验动物研究中心提供,合格证号:SCXK(鄂)2003-0005。
DIO1大孔吸附树脂由天津骨胶厂提供;薄层层析和柱层析硅胶G(100目~200目)由青岛海洋化工厂生产;甲醇和乙腈为色谱纯,其余试剂均为分析纯;胎牛血清,由深圳达科为生物技术有限公司提供,批号:20061203;DMEM/F12培养基,Hyclone公司产品,批号:NRCO005,加入胎牛血清配成浓度10%的完全培养液;淋巴细胞分离液,密度1.077g·ml~,Axia—Shield公司产品,批号:1002380;刀豆蛋白(ConA),Sigma公司产品;四甲基偶氮唑蓝(MTr),Amreseo公司产品,用DMEM培养液配成0.5%的溶液,0.22m滤膜除菌;二甲亚砜(DM—SO),Kehaoze公司产品。
Agilent1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);AgilentZorbaxSB—C18色谱柱(250mm×4.6mm,5Ixm);CO恒温培养箱(美国Thermo公司);TS100.F—PH倒置荧光相差显微镜(日本尼康公司);AC100—110酶标仪(瑞士TECAN公司)。
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