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香兰素学名3一甲氧基一4一羟基苯甲醛,是世界上产量最大的合成香料。在中国香兰素主要用于食品添加剂,此外也广泛用于化妆品中,食品添加剂香兰素国家标准(GB一3861—2008)中使用气相色谱法测定香兰素含量,用面积归一化法计算香兰素含量,该方法繁琐,准确度低,参照用反相高效液相色谱法测定香兰素含量的分析研究文献,研究建立反相高效液相法测定香兰素含量,方法灵敏度高,专属性强,结果准确可靠。
戴安P680高效液相色谱仪。香兰素;乙腈为色谱纯。
色谱柱:C18;流动相:乙腈一0.05mol/L醋酸溶液(20:80);检测波长:279nm;流速为1.0ml/min;进样量:201lI。
取香兰素适量:精密称定,加流动相溶解并稀释制成每lml中含香兰素20g的溶液,作为供试品溶液。在200~400nm波长范围内扫描。试验结果为:香兰素在21lnm、23lnm、279nm、310nm波长处均有最大吸收,由于21lnm、23lnm靠近末端吸收,279nm波长吸收值比310nm更强。根据上述试验结果,香兰素含量测定的检测波长选择为279nm。
取香兰素对照品20mg,置100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为贮备液。分别精密量取上述贮备液1ml、lml、2ml、3ml与5ml,分别置50ml、20ml、20ml、20ml、25ml等5个量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀。精密量取上述溶液各20l,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。进行线性回归,R2=0.9999,表明线性关系良好。
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