咪达哩仑（midazolam）注射液为麻醉药，临床用于全身或局部麻醉，或麻醉辅助用药。咪达哩仑注射液处方中常使用适量的依地酸二钠作为稳定剂，因其能与金属离子形成稳定的水溶性配合物，从而降低药物与金属离子间的氧化反应，提高药物的稳定性。但过量使用依地酸二钠会与血液及骨骼中的钙形成水溶性螯合物被排出体外，容易引起低钙血症或骨钙流失。因此有必要对咪达瞠仑注射液中的辅料依地酸二钠含量进行控制以保证药品质量。目前《中国药典》中咪达哩仑及其相关制剂标准中并未对依地酸二钠进行控制。

本文参照相关文献31建立了高效液相色谱法测定咪达哩仑注射液中依地酸二钠的含量，并对3个不同企业的咪达醴仑注射液进行检测和分析。目前，依地酸二钠检测在《中国药典》二部2015年版中有收载何，但其测定方法为容量分析法，无法消除咪达瞠仑注射液中其他成分的干扰。本方法能准确、方便地测定咪达瞠仑注射液中依地酸二钠的含量，为该药质量控制提供科学依据。

1材料

高效液相色谱仪（LC-20ADX4输液泵，SIL20AC自动进样器，CTO-20AC柱温箱，CBM-20A系统控制器，DGU-20A5在线脱气机，SPD-M20A-极管阵列检测器，SPD-20AUV检测器.日本岛津）。依地酸二钠对照品（USP对照品，批号：IOD405,纯度：100.0%）；咪达哩仑注射液（A、B、C企业共15批）；甲醇、乙月青为色谱纯；40%四丁基氢氧化鞍溶液、磷酸均为分析纯，水为Millipore纯化水。

2方法

2.1色谱条件

照高效液相色谱法（《中国药典》2015年版二部四部通则0512）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（AgelaVenusilMPClg4.6mmX250mm,5gm）,以0.4%四丁基氢氧化鞍溶液（取40%四丁基氢氧化较溶液13mL,加水1440mL,混匀，用磷酸调节pH至7.4）-甲醇-乙月青（82：16：2）为流动相A,水-甲醇（20:80）为流动相B；按表1进行梯度洗脱；检测波长：254nm；柱温为40°C；流速：1.0mLmin7,进样量：lOOyL；自动进样器控温10°Co

2.2对照品溶液的制备

取依地酸二钠对照品约50mg.精密称定，置100mL量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取ImL,置100mL量瓶中，用0.075%醋酸铜溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.3供试品溶液的制备

精密量取样品ImL,置10mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL置10mL量瓶中，用0.075%醋酸铜溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（含依地酸二钠为5ng•mL_,）o

2.4空白溶液的制备

将3个企业的处方中除依地酸二钠外的其他成分作为空白辅料，按照“2.3”项下方法制备空白溶液。3结果3.1专属性试验取空白溶液、供试品溶液和对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，结果依地酸二钠峰形良好,且和咪达哩仑分离良好，空白辅料无干扰，见图lo