1引言

小麦是全世界分布范围最广、种植面积最大、总产量最高、贸易额最多的粮食作物，是世界上1/3以上人口的主食。我国是全球小麦产量和消费量最大的国家，小麦是仅次于水稻而居第二位的粮食作物，在我国粮食总量平衡中占有重要地位，素有“中原粮仓”和“中国厨房”之称的河南，不仅小麦产量占全国总产量的26%,而且是全国最大的小麦粉及面制品生产基地。因此，小麦粉的食用安全性对我国以及河南省的经济发展以及人民生活意义重大。仅面粉允许添加的食品添加剂就有面粉处理剂、抗氧化剂、水分保持剂、膨松剂、酸度调节剂、稳定剂、凝固剂、抗结剂等多种。这些食品添加剂都有严格的使用标准，但在生产过程中时常有超范围或超量使用的情况，尤其是在溴酸钾、过氧化苯甲酰、硫酸铝钾等相继被禁止在面粉中使用后，小麦粉中是否有未被监控的、未知的食品安全危险物质值得注意[^。我省在对以往的抽检样品中发现疑似乙二胺四乙酸二钠的异常峰。

乙二胺四乙酸二钠目前可以作为稳定剂、凝固剂、抗氧化剂、防腐剂使用，但是不能用在小麦粉中。若不按规定或超限量使用乙二胺四乙酸二钠，就会影响人的身体健康，导致人体中微量元素的流失，对上呼吸道、眼睛、黏膜产生影响，可引起呕吐、腹泻、和急腹痛等症状。因此，研究对小麦粉中乙二胺四乙酸二钠的检测研究就显的尤为重要。

目前，食品中乙二胺四乙酸二钠的检测方法主要包括GB5009.278-2016和SN/T3855-2014，但这2种方法都不适用于小麦粉。因此，本研究优化了高效液相色谱法测定小麦粉中乙二胺四乙酸二钠含量的方法，以期为相关部门的监管提供技术参考。

2材料与方法

2.1仪器与试剂

Agilent1260高效液相色谱仪，附二极管阵列检测器(美国安捷伦公司）；色谱柱：HypersilGOLDSAX(4.6rnmx150mm,5)im，美国ThermoScientific公司）；DiamonsilPlusC丨8(4.6mm><250mm,5(im，迪马科技公司）。甲醇(色谱纯，迪马科技公司)；浓盐酸.浓磷酸、三氯化铁FeClr6H20(分析纯，阿拉丁试剂有限公司)；乙二胺四乙酸二钠二水合物标准品(99.5%，N11936-1G,上海安谱科学仪器有限公司）

2.2实验方法

2.2.1标准溶液的配制0.02mol/L三氯化铁溶液：称取0.54g.三氯化铁，溶于90mL水中，转移至100mL容量瓶中，加人0.03mL浓盐酸，加入超纯水定容至100mL，混匀，备用。1.0mol/L磷酸溶液：量取68mL浓磷酸，超纯水稀释，定容至1000mL,混匀，备用。乙二胺四乙酸二钠标准储备溶液：准确称取100mg乙二胺四乙酸二钠二水合物标准品，用水溶解转移入棕色容量瓶中，加人超纯水定容至50mL，得到质量浓度为2.0mg/mL的标准储备溶液，4°C条件下储存备用。

2.2.2样品处理方法称取面粉2.5g，分别加水和三氯甲烷各10mL,震荡20min超声20min,8000r/min离心10min,移取上清液于50mL离心管中。加人水10mL，重复以上步骤，收集上清液。合并上清液。衍生化：上清液中加入2mL=；氯化铁混合，然后水定容，超声10min,过滤上机。

2.2.3液相色谱条件[|°-141色谱柱C18(250mm><4.6mm,5.0nm);流动相：甲醇：四丁基溴化铵-乙酸钠混合溶液(pH4.0)体积比为5:95;流速：1.0mL/min;柱温：35°C;检测波长：254nm;进样量：10|iL。

3结果与分析

3.1前处理条件的优化

按照国标GB5009.278-2016方法对面粉样品进行前处理。面粉样品加水震荡20min,静止30min后高速(12000r/min)离心，离心液过固相萃取柱。实验发现，由于面粉中含有大量的淀粉、蛋白等大分子有机物，加水震荡离心后会使大分子化合物析出，从而导致SPE小柱堵塞，影响了实验结果准确性。参考相关文献资料采用三氯甲烷净化，通过加标回收实验，提取液经三氯甲烷液液萃净化后，回收率在90%以上，同时在三氯甲烷和水相两相交界处会有大量白色粘稠物析出。结果显示，与固相萃取小柱净化相比，采用三氯甲烷净化，成本更低，结果更准确.