1.高效薄层色谱法的原理

薄层色谱法采用液体作为流动相，属于液相色谱法范畴，它与高效液相色谱在分离的机理上是相同的，不同的是薄层色谱的分离过程是在平面上而不是在色谱柱内进行，故薄层色谱属于平面色谱法。按其固定相的性质和分离机理可分为吸附薄层法、分配薄层法、离子交换薄层法以及凝胶薄层法等，其中前二者应用较多，这里仅讨论吸附薄层法。

吸附薄层法是将吸附剂(固定相)均匀地涂布在玻璃、金属等载板上形成薄层，在薄层的一端点上试样溶液，置于展开室中，将薄层的下端浸入合适的展开剂(流动相)，借毛细作用使溶剂上升。此时，试样组分不断地被吸附剂吸附，又被溶剂溶解解吸，如此随展开剂向前移动，由于吸附剂对不同组分有不同吸附能力，展开剂也有不同的解吸能力，因此在流动相向前移动的过程中，不同组分移动的距离不同，从而得到分离。

2.高效薄层色谱法与薄层色谱法比较，表现以下特点

1）薄层性能：薄层的性能对分离效率起决定性作用。高效薄层色谱法是由微小颗粒的吸附剂，用喷雾法制备成均匀薄层。由于吸附剂颗粒小，流动相展速慢，容易达到平衡，质量传递的阻滞可以忽略，从而使检出灵敏度及分离效率等方面比普通薄层色谱提高很多。

2）点样：薄层上样品展开后所形成的斑点越小而圆(点状点样)或越细而窄(带状点样)，分离效率则越高。而斑点大小与原点直径有关，故点样是很重要的步骤。高效薄层色谱法采用自动点样器，进行点状或带状点样，采用先进计算机编程控制点样量、点样次数、点样间距、点样速度、点样形状及大小等，使定量分析高度自动化，大大提高了分析结果的重现性。

3）展开：高效薄层色谱法有多种方式的展开技术。特别是自动多层展开技术的广泛应用，使高效薄层板可自动展开多达20～30步，大大提高了分离效果及分析结果的稳定性。其特点是以微型计算机预编程序，设计了一个展开剂极性很宽的梯度程序，展开剂极性生由高到低，每一次展距都比前一次增加，每次展开前溶剂按要求混合后由泵送至展开室，展开后自动吹干，并开始下一个程序，这样不仅每次展开后的斑点得到浓集，大大改善了分离效果，而且可以用给定程序在同一薄层上分离极性相差不大的组分。

4）定量分析：高效薄层色谱法通过采用扫描仪器而实现定量分析，每个斑点最低检出量可以达到纳克(ng)级。目前市售的薄层色谱扫描仪均配有功能强大的管理软件，可以控制薄层色谱扫描仪的操作并进行扫捕结果的数据处理以及分析报告的输出。

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