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中药对照品提取实验操作步骤-----个人小结

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海阔天空 2020-11-03 15:26 评论( 0 ) 浏览( 1710 )
1、原材料采购:根据实验需求对材料进行选择确定后采购优质原材料; 2、粉碎:将原材料在粉碎间处理,有利于增加原料的面积,加快原料吸水速度。 3、浸泡:将粉碎处理的原料用溶剂(一般是水和乙醇比例)浸泡一段时间,让溶剂充分吸收原料中的物质; 4、分液和萃取:将浸泡的溶液进行收集后把两种互不相溶、密度也不相同的液体分离开的方法。萃取是利用溶质在互不相溶的溶剂里的溶解度不同,用一种溶剂把溶质从它与另一种溶剂所组成的溶液中提取出来的方法。选择的萃取剂应原溶液中的溶剂互不相溶;对溶质的溶解度要远大于原溶剂,并且溶剂易挥发。 5、低压冷凝蒸馏:利用低压冷凝沸点不同将混合物(母液)分离,此时一般的浓度在50%左右。低压蒸馏的三个重要因素:压强、水浴、冷凝。在打开使用装置时注意开关顺序,关闭时和打开相反。一般会遇到的问题是压强下不去,解决办法:检查装置是否漏气;检查旋转处是否发热发烫;检查真空泵是否需要换水。 6、过柱子:原理利用在流动相冲洗下,不同物质在固定相上“跑的速度的快慢”来将不同物质分离出来。正向硅胶柱上极性越低的物质爬得越快,反向硅胶柱上极性越大的物质爬的越快。根据提纯物质的极性大小正确选择正向和反向柱子。过柱子前保证柱子无汽泡,无污渍后根据药典提供的方法用一定比例的溶剂洗柱子后上样,一般正向柱子干法上样,反向柱子湿法上样。上样后根据药典的方法用不同浓度梯度的溶剂过柱子将溶液收集,利用薄层色谱法和对照品点板或者液相检测,收集含有提纯物质的溶液进行低压蒸馏检测浓度。根据液相检测的结果会重复过柱子去提高提纯物质的纯度。 7、高压制备:在检测纯度没有达标或必要的情况下会选择高压液相色谱,流动相改为高压输送;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱;同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统。 8、蒸发和结晶:蒸发是将溶液浓缩,溶剂气体或使溶质以晶体析出的方法。结晶是溶质从溶液中析出晶体的过程,可以用来分离和提纯几种可溶性固体的混合物。结晶的原理是根据混合物中各成分在某种溶剂里的溶解度的不同,通过蒸发溶剂或降低温度使溶解度变小,从而析出晶体。 9、保存和装样:将达标的产品在干燥箱内干燥后装袋密封低温保至冰箱,需要时用分析天平进行称重装瓶。
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