现象:峰宽
原因:1.流动相组成变化、2.流动相流速太低、3.漏液(特别是在柱子和检测器之间)、4.检测器时间常数太大、5.柱外效应影响:①柱子过载、
②检测器对反应时或池体积响应过大③柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大④记录仪响应时间太长、6.缓冲液浓度太低、7.保护柱污染或失效、8.柱头塌陷,色谱柱污染或失效塔板数较低、9.呈现两个或多个未被完全分离的物质的峰、10.柱温过低、11.保留时间过长。
排除方法:1.重新制备新的流动相、2.调节流速、3.检查接头是否松动、泵是否漏液,是否有盐析出以及不正常的噪声。如果必要,更换密封、4.调整设定5.采取各种措施尽量减小柱外效应
①减小进样体积
②减少响应时间成使用更小的流通池
③减小管路长度,使用内径合适的短管路
④减少响应时间
6.增大缓冲液浓度,调整合适的pH值
7.更换或重新装填保护柱
8.重新装填被污染的部分,再生色谱柱或更换新柱
9.优化分离条件,分离未被分离组分
10.调整适宜柱温
11.保留时间过长
11.改变流动相组分增加洗脱能力或者使用梯度洗脱