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揭开新冠病毒检测的面纱-PCR

沈磊-会员头像-www.bzwz.com伟业计量
沈磊 2020-12-29 21:35 评论( 0 ) 浏览( 1061 )

今年的新冠病毒给全世界的都带来了相当大的影响,核酸检测也是频频被提起的词汇,而我们国家的核酸检测能力,大家也是有目共睹的,我们是如何做到的呢?到底什么是核酸检测呢?

这就不得不说PCR检测技术。2018年在我们国家流行的非洲猪瘟病毒,其实也是属于核酸病毒。两者的检测原理和方法差不多。

PCR检测,也就是分子生物学检测。也就是利用聚合酶链式反应的技术,简单讲主要为两步:1、核酸的提取,2、基因的扩增。

1、核酸的提取

核酸的提取:主要使用的是免疫磁珠吸附的技术。他是以抗体包被的磁珠为载体,通过抗体与反应介质中特异性抗原结合,形成抗原-抗体-磁珠免疫复合物,此磁珠复合物在外加磁场作用下定向移动,使复合物与其他物质分离,从而达到分离、富集特异性抗原的目的。撤去磁场,可收集磁珠,将抗原解离下来进行鉴定或进行PCR荧光定量。

2、基因的扩增

基因的扩增:首先使模板DNA或者RNA变性,双链解离为单链,然后复性(模板DNA与引物的退火),引物与DNA单链互补序列配对结合,最后引物的延伸,在DNA聚合酶的作用下,按照碱基配对与半保留复制的原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。理论上复制次数为2的n次方,n为循环数。得到下图的扩增曲线。

如果为阴性样品的话,一般不扩增,如果为阳性样品,会有明显的扩增曲线,我们一般根据扩增曲线阈值判断结果。

由于基因扩增的速度是非常快的,1个模板DNA单链,在很短的时间里,就可以扩增到相当大的数量。因此我们在采样的同时,可以将足够多分量的样品混合,一起筛选,如果出现阳性样,在逐级减少混合数量,直至筛选出阳性样品,这样大大提高了筛选的速度,这也是我们现在主流的筛选方法。千万要注意的是,扩增后的样品,具有非常大的污染性,一定要严格按照要求灭活处理!!!!

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