大黄素(emodin)又称朱砂莲甲素，化学名为1，3，8。三羟基一6甲基蒽醌，为中药材大黄、虎杖、决明子等药材中的主要有效成分。大黄素具有抗炎、抗癌、免疫调节、肾保护、利胆、利尿、降低内毒素、改善心血管系统和微循环等药理作用。在中国药典2010年版规定大黄素成分可用于中药材大黄、虎杖、决明子、黄氏响声丸、牛黄解毒片、三黄片等数十种药材及中成药的质量控制。根据我国计量法和一级有证标准物质研制的技术规范及管理要求等相关技术文件，笔者利用高效液相色谱法(HPLC)对大黄素纯度标准物质候选物样品进行了均匀性检验和稳定性考察、采用HPLC与差示扫描量热法(DSC)2种不同技术原理方法实现对大黄素纯度标准物质候选物样品化学纯度联合定值研究，并对定值结果进行了不确定度的评估，保证了研制标准物质定值结果的科学性和准确性。笔者研制的大黄素国家一级纯度有证标准物质，具有可溯源性与量值传递功能，该品种的化学纯度标准物质在国内外均属首次研制。标准物质可用于国际交流、药物质量监测、仪器校准等领域，计量有证标准物质的研制将促进我国与国际药品质量接轨，对我国中药的标准化与现代化均起到重要的推动作用。

1材料

大黄素原料来源于陕西森弗生物技术有限公司，批号：20110614。

1．1高纯度标准物质候选物样品的制备

采用重结晶纯化步骤：将提取获得的大黄素粗品50g溶于500mL的氯仿一甲醇溶液中，加热到120℃回流2h，过滤后将续滤液自然冷却析晶12h，再次过滤获滤饼，经60℃减压干燥6h获得黄色粉末状样品；重复2次获得经HPLC检测相对化学纯度为99．6％的高纯度大黄素化学纯度标准候选物样品。

1．2化合物结构确证

采用四大光谱技术进行大黄素化学纯度标准候选物样品的分子结构确证研究：

①紫外分光光度法：吸收光谱在200～400nm内扫描，结果样品于222，254，288am处有最大吸收峰。

②红外光谱法：结果样品于3398，2980，2930，2596，1663，1674，1624，1563，1477，1448，14l6，1388，1353，1313，l297，1264，1224，ll70，1101，1033，994，938，908，894，874，852，822，769，742，723，674，634，612，582，560，550，472，453，429cm位置存在吸收峰。

③质谱法：经ESI．MS检测获得117．2，269．3(M一1)分子碎片峰。

④核磁共振法：H—NMR(DMSO)8：2．30(3H，S，CH3)，6．46(1H，S，H一2)，6．95(1H，S，H·4)，6．97(1H，S，H．7)，7．27(1H，S，H一5)，11．27(1H，S，C3一OH)，11．83(1H，S，C8．OH)，l1．92(1H，S，C1-OH)；C-NMR(DMSO)8：161．3(C一1)，107．7(c一2)，165．5(c一3)，108．6(C-4)，120．3(C一5)，148．0(c-6)，123．9(C一7)，164．4(C一8)，189．4(C一9)，180．9(C一10)，134．8(c一1l1，113．o(c一12)，108．7(C一13)，132．5(c一14)，21．4(CH3)。

以上数据与已知大黄素结构文献对照数据一致，可确定化合物为大黄素，图1为大黄素的化学结构式。

1．3仪器与试剂

1．3．1仪器

Agilent1200型高效液相色谱仪(DAD检测器，美国Agilent公司)；DSC．1型差示扫描量热仪(瑞士梅特勒．托利多公司)；XS．105型分析天平(感量0．01mg，瑞士梅特勒．托利多公司)；TU一1901型双光束紫外可见分光光度计(tL京普析通用有限责任公司)。

1．3．2试剂

甲醇f色谱纯，美国FisherChemical公司)；磷酸(分析纯，北京化学试剂公司)；纯净水(娃哈哈集团有限公司)；一级铟标准物质【GBW13202，熔点：(429．75~0．01)K，中国计量科学院1。