大豆磷脂酰胆碱是大豆磷脂的主要活性成分,大豆磷脂作为天然乳化剂、增溶剂、分散剂广泛应用于药物注射剂中,故大豆磷脂酰胆碱也是--种用于注射剂的药用辅料。注射剂直接注人人体,其细菌内毒素的含量或限值有严格规定,所用辅料也必须符合相应规定2015年版《中国药典》尚未将大豆磷脂酰胆碱作为药用辅料收载,本研究中参照2015年版《中国药典(四部)》通则细菌内毒素检查法,全面考察了大豆磷脂酰胆碱的细菌内毒素检查方法,以进一步控制注射剂质量。现报道如下。

1仪器与试药

仪器:TW12型六孔恒温水浴(德国Julabo公司);MS3basic型旋涡混合器(德国IKA公司);LKL164-03型内毒素定量仪(英国LabKinetics公司);2-16KL型低温高速离心机(德国Sigma公司)。

试药:大豆磷脂酰胆碱(德国LipoidGmbH,批号为579010-1150055-13,579010-1160058-15,579010-1160059-05,规格为原料,含量为98%);细菌内毒素工作标准品(中国食品药品检定研究院,批号为150601-201580,规格为每支80EU);细菌内毒素检查用水(BET水,批号为1606290,规格为每支100mL),鲎试剂A(TAL,批号分别为1606142,1607201,规格为每支0.1mL,灵敏度分别为0.25EU/mL和0.06EU/mL),鲎试剂C(KCA,批号为1709140,规格为每支1.25mL,灵敏度为50~0.005EU/mL),均购自湛江安度斯生物有限公司;鲎试剂B(TAL,福州新北生物有限公司,规格为每支0.1mL,批号分别为16031712,16020712,灵敏度分别为0.25EU/mL和0.06EU/mL)。

2方法与结果

2.1细菌内毒素限值

各国药典均未收载该品种，而在厂家所附标准中,细菌内毒素限值为每1g大豆磷脂酰胆碱含内毒素的量应小于6EU。该品种是大豆磷脂的主要活性成分,其在药物制剂中的功能和用途与大豆磷脂相似,2015年版《中国药典(四部)》收载的大豆磷脂(供注射用)31468-470的细菌内毒素限值为每1g大豆磷脂含内毒素的量应小于2.0EU。综合考虑,本研究限值确定为2.0EU/g。

2.2细菌内毒索含量检测(凝胶法)

2.2.1鲎试剂灵敏度复核试验

按2015年版《中国药典(四部)》通则1143“细菌内毒素检查法”进行鲎试剂标示灵敏度(入)复核。结果4批鲎试剂λc为0.5~2.0λ,符合进行细菌内毒素检查的规定。详见表1。