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《国家中长期教育改革和发展规划纲要(2010—2020年)》明确提出:优化学科专业、类型、层次结构,促进多学科交叉和融合。学科交叉融合不仅可以拓展学生视野,带来思维的碰撞和启迪,激发学生的自主学习意识和创新实践能力,更有助于推动高等院校学科协同发展,完善具有跨学科视野和协同创新意识的复合型人才培养机制卩⑷。基础生物化学实验课程是我校生命科学学院生物实验教学中心(以下简称“中心”)面向本校药学专业大二年级开设的基础性实验必修课。
以往的实验教学内容来源于本院教师多年教学成果,涵盖了生物化学领域诸多重要基础理论与实验技术,知识体系成熟;但与选课学生专业关联度弱,导致学生学习积极性不高。为此,中心通过开展以跨学科交叉融合为特色的实验教学体系研究,探索并尝试了基于学科交叉的实验教学内容改革,旨在打破生命科学与药学专业课程之间的壁垒,让学生能够将生物学的理论和方法灵活运用于药学领域的相关研究中,维生素C含量测定就是改革内容之一。
维生素C(Vc)又名抗坏血酸,是维持机体正常活动的重要维生素之,广泛参与机体氧化、还原等复杂代谢过程。Vc是世界卫生组织及联合国工业发展组织共同确定的人类26种基本药物之一,可用于防治坏血病,增加人体免疫力,辅助各种急、慢性传染性疾病,紫瘢以及癌症等多种疾病的临床治疗。但Vc具有强还原性,在氧化剂、热、光、碱性物质以及铜、铁等金属离子的影响下很容易被氧化分解而失效。原实验教学内容只是在单一条件下对样品中Vc含量进行测定,并未涉及影响Vc稳定性诸多因素的考察。而对于药学专业而言,研究Vc稳定性影响因素对于相关药剂配方、贮存条件和药物配伍都具有重要的实践指导意义。要考察Vc稳定性影响因素,首先要选择并建立起科学合理的检测方法。Vc含量测定方法有很多,如碘量法、2,4-二硝基苯腓法、高效液相色谱法等,但碘量法和2,4-二硝基苯脐法所用试剂具有一定毒性,而高效液相色谱法成本较高,均不适于受众面广的基础实验教学。原教学内容中采用2,6-二氯靛酚滴定法对Vc进行定量,但2,6-二氯靛酚试剂不稳定,且滴定终点依靠主观判断,对于低年级本科生而言,经常容易因实践经验不足而造成较大误差。因此,改进后的实验内容采用紫外分光光度法检测Vc含量变化,该方法具有准确稳定、快速简便、试剂安全、成本低廉等诸多优点,且不易受其他还原性物质成分的干扰。
仪器:Nanodrop2000C超微量分光光度计;水浴锅;酸度计;电子天平等。试剂:Vc标准品(购自北京索莱宝科技有限公司,分析纯);碳酸氢钠、焦亚硫酸钠、乙二胺四乙酸二钠、硫酸铜(购自天津市化学试剂供销公司,分析纯);新煮沸后冷却的蒸憎水等。
3.1.12xVc标准储备液(200mg/L)的配制准确称取0.020g的Vc标准品置于小烧杯中,用蒸懈水充分溶解;转移到100mL容量瓶中,定容至刻度,摇匀后等分成2份,用碳酸氢钠粉末调节pH,分别配制成pH6.0和pH&0的2xVc标准储备液。
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