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3,5-二硝基水杨酸法测定黄水中总糖的含量

大C-会员头像-www.bzwz.com标准物质网 大C 0 559 2021-07-21
【摘要】建立3,5-二硝基水杨酸(DNS)测定黄水中总糖含量的方法,对检测条件和黄水总糖水解条件进行优化,并进行方法学考查。结果表明,最佳检测条件:显色剂添加量5mL,显色时间7min,显色温度90℃;黄水总糖水解条件为:水解时间30min,盐酸浓度12mol/L,盐酸添加量15mL;精密度、重复性和稳定性试验结果的相对标准偏差(RSD)均小于2%,加标回收率94.60%~97.60%,RSD值均小于2%。该方法准确、可靠、重现性好,可用于黄水中总糖含量的测定。
  • 黄水是浓香型白酒主要的副产物,黄水中含有丰富的酸类、酯类、醇类等呈香呈味物质,同时含有大量的糖和蛋白质等大分子物质,限制了黄水的应用,通常将黄水经预处理后再利用,总糖含量是评价处理效果的标准之一。

    实验室常用的总糖检测方法是滴定法与比色法,滴定法对溶液中的总糖含量、滴定速度、滴定环境等都有要求,且个人操作上的习惯、熟练程度等都会对结果造成较大的影响。黄水颜色一般为亮黄色、深黄色甚至黑色,也会干扰对滴定终点的判定。比色法常用的有苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法、3,5-二硝基水杨酸法,但前两种方法用的硫酸腐蚀性较强,会造成一定的安全隐患。

    3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法)是半微量定糖法,该方法操作简单、便捷,杂质干扰较少,便于批量测定,是一种常用的测糖方法。该方法的原理是在碱性条件下还原糖将3,5-二硝基水杨酸中的硝基还原成氨基,生成橘红色化合物,在一定的范围内,还原糖含量与颜色成正比。

    本试验采用盐酸将黄水中的总糖水解成还原糖,利用DNS法在最适波长下进行检测,利用吸光值与还原糖之间的线性关系计算黄水中总糖含量。本研究考察显色剂添加量、显色时间、显色温度对检测结果的影响,采用正交试验确定黄水总糖水解条件,并进行方法学考察,建立3,5-二硝基水杨酸测定黄水中总糖含量的方法,以期为黄水的预处理等应用提供参考依据。

    1材料与方法

    1.1材料与仪器

    黄水,取自洋河酒厂浓香车间。重蒸酚,上海一基实业有限公司;葡萄糖3,5-二硝基水杨酸酒石酸钾钠盐酸氢氧化钠无水亚硫酸钠均为分析纯,国药集团化学试剂有限公司。电热鼓风干燥箱,上海左乐仪器有限公司;纯水机,上海摩勒科学仪器有限公司;水浴锅,常州市亿能实验仪器厂;UV-6000PC型紫外/可见分光光度计,上海元析仪器有限公司。

    1.2试验方法

    1.2.1试剂的配制

    DNS试剂的配制:称取6.3g3,5-二硝基水杨酸溶于262mL2mol/L的氢氧化钠溶液中。将此溶液与500mL含182g酒石酸钾钠的热水混合,再添加5g重蒸酚和5g亚硫酸钠,搅拌溶解后定容至1000mL,充分混匀,存于棕色瓶中,避光存放7d后使用。1mg/mL葡萄糖标准溶液:精密称取已烘干的葡萄糖1g,加纯水定容至1L,充分摇匀备用。

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