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口蘑属为口蘑科中最大的一个属,主要分布于北半球的寒温带和亚热带地区,目前世界上已发现口蘑属真菌1000多种,其中中国记载有90多种。国内外对该属真菌中松口蘑、蒙古口蘑、皂味口蘑等化学成分的研究较多,已分离出萜类、甾体类、苯酮类、聚酮类等化合物,这些次生代谢产物具有抗肿瘤、抗HIV、抗高血压、免疫调节等活性,得到越来越多的天然产物化学研究者的关注。
杨树口蘑TricholomapopulinumJ.Lange是一种生长于杨树林地的食用菌,分布在内蒙古、河北、东北等北方地区,国内外未见对其化学成分的报道。为了从高等真菌中寻找具有生物活性的次生代谢产物,课题组对杨树口蘑化学成分进行研究,从其甲醇提取物的乙酸乙酯萃取部分分离并鉴定出9个化合物,均为首次从该真菌中分离得到。
VGAutoSpec-3000质谱仪(英国Micromass公司);BrukerAV-400MHz、DRX-500MHz核磁共振波谱仪(德国Bruker公司);Agilent1100分析型、制备型高效液相色谱仪、ZorbaxSB-C18色谱柱(美国Agilent公司);柱层析硅胶、CF254薄层硅胶板(青岛海洋化工厂);SephadexLH-20(瑞典AmershamBiosciences公司)。所用试剂均为分析纯。杨树口蘑于2015年9月采自辽宁朝阳,由鞍山师范学院化学与生命科学学院张福维副教授鉴定为正品,样品标本保存于鞍山师范学院化学与生命科学学院生物实验室。
将5kg杨树口蘑粉碎后,用甲醇浸泡3次,每次约5d,合并滤液减压浓缩至浸膏380g,向浸膏中加水形成悬浊液后用乙酸乙酯萃取3次,萃取液合并,回收溶剂得乙酸乙酯部分80g,上硅胶柱色谱,以石油醚-丙酮(100:0~0:100)梯度洗脱得6个组分(Fr.1~6)。组分Fr.2~4经硅胶柱、SephadexLH-20和反相-高效液相色谱制备柱反复分离纯化,得化合物1(105mg)、2(15mg)、3(24mg)、4(11mg)、5(24mg)、6(23mg)、7(21mg)、8(13mg)、9(9mg)。
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