卵磷脂最早被发现于大脑和蛋黄中，被誉为“第三营养素”。蛋黄卵磷脂富含ω-3系列长链多不饱和脂肪酸（LC-PUFA），具有提高记忆、增强免疫、保护肝肺、调节血脂、防治糖尿病、延缓机体衰老、防止青少年肥胖等多种保健功能。

目前，卵磷脂已成为一种比较热销的保健品。比较经典的总磷脂测定方法主要包括干法消化钼蓝比色法、湿法消化的抗坏血酸钼蓝比色法等，均为无机定磷检测方法，具有准确性高、重复性好等优点；但消化时间长、操作过程复杂。硫氰亚铁铵比色法操作简单、快速，该方法对血清中总磷脂的测定已有报道，但在蛋黄总磷脂的测定中鲜见，试验参照Stewart报道的经典总磷脂硫氰亚铁铵比色法，设计蛋黄卵磷脂产品的硫氰亚铁铵比色法。

1 材料与方法

1.1 试验试剂

卵磷脂（生物试剂，阿拉丁）；蛋黄卵磷脂样品（实验室自制）；硫氰酸铵、六水合三氯化铁、钼酸钠、氧化锌、硫酸肼、氢氧化钾（均为分析纯，上海凌峰化学试剂有限公司）；磷酸二氢钾（分析纯，广东光华科技有限公司）；三氯甲烷、无水乙醇、丙酮、硫酸、盐酸（均为分析纯，上海凌峰化学试剂有限公司）。

1.2 试验仪器与设备

UV-5200PC紫外可见光分光光度计（上海元析仪器有限公司）；KA-1000离心机（上海安亭科学仪器厂）；HH-6数显恒温水浴锅（常州澳华仪器有限公司）；AB135-S电子天平（METTLERTOLEDO）；UPK-1-5T优普系列超纯水器（成都超纯科技有限公司）；SX2-4-10箱式电阻炉（上海锦屏仪器仪表有限公司）；FD-2密封式恒温可调电加热器（嘉兴市欣欣仪器设备有限公司）。

1.3 试验方法

1.3.1 测定波长的确定

精密吸取0.5mL0.315mg/mL的标准品储备液和磷脂样品液于10mL具塞离心管中，添加2mL硫氰亚铁铵显色液[三氯化铁（FeCl3·6H2O）13.52g、硫氰酸铵（NH4SCN）15.2g，用蒸馏水溶解定容至500mL容量瓶中]，补加氯仿使氯仿层体积至3mL，振荡混合2min，于25℃保持30min；3600r/min离心10min，吸取下层液体于200~1000nm的波长下进行光谱扫描，以氯仿为空白对照。

1.3.2 显色剂用量的确定

取7组相同的磷脂待测液1.0mL于10mL的具塞离心管中，分别加入0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0和3.5mL硫氰亚铁铵显色剂，补加氯仿使氯仿层体积至3mL，振荡混合2min，于25℃保持30min；3800r/min离心10min，吸取下层液于470nm处分别测定其吸光度，每组各做3次平行试验。

1.3.3 显色温度的确定

取5组磷脂待测液各1mL，添加2mL硫氰亚铁铵显色液，补加氯仿使氯仿层体积至3mL，振荡混合2min，分别于20℃，25℃，30℃，35℃和40℃水浴中保温30min；3600r/min离心10min，吸取下层液于470nm处分别测定其吸光度，每组各做3次平行试验。