邀好友领红包

北方伟业计量集团有限公司

  • 标准物质/标准样品生产认可证书
  • CNAS实验室认可证书
  • 标准物质定级证书
  • 豫南检测资质认定证书
  • 质量管理体系认证证书
  • 伟业计量高企认证证书
  • 中国计量测试学会合作单位

生物化学中常见缓冲液分析

毛绪寰-会员头像-www.bzwz.com伟业计量
毛绪寰 2021-05-28 15:05 评论( 0 ) 浏览( 1672 )

一、磷酸盐缓冲液

磷酸盐是生物化学研究中应用最普遍的一类缓冲剂,鉴于这些是二级解离,有2个pka值,因此 用这些配置的缓冲液,pH范畴最宽:

NaH2P04:pKa1=2.12,pKa2=7.21

Na2HP04:pKa1=7.21,pKa2=12.32

配酸性缓冲液:用NaH2P04,pH值为1~4。

配中性缓冲液:用混和的两类磷酸盐,pH值为6~8。

配碱性缓冲液:用Na2HP04,pH值为10~12。

磷酸盐缓冲液的优势为:

1.易于配置成多种浓度值的缓冲液;

2.适用的pH范畴宽;

3.pH受温度的干扰小;

4.缓冲液稀释后pH变动小,如稀释10倍后pH的变动低于0.1。

其劣势为:

1.易与常见的Ca2+、Mg2+以及重金属离子缔合生成沉积;

2.会能够抑制一些生物化学过程,如对一些酶的催化反应会形成某种程度的抑制作用。

二、Tris缓冲液(三羟甲基氨基甲烷)

Tris缓冲液在生物化学研究中应用的逐渐增多,有超出磷酸盐缓冲液的趋势,如在SDS-聚丙烯酷胶凝胶电泳中己都应用Tris缓冲液,而很少再用磷酸盐。

Tris缓冲液的常见合理有效pH范畴是在"中性"范畴,比如

Tris-HCl缓冲液pH值为7.5~8.5

Tris-磷酸盐缓冲液pH值为5.0~9.0

Tris-HCl缓冲液的优势是:

1.鉴于Tris碱的碱性较强,因此 能够仅用这一类缓冲体系,配置pH范畴由酸性到碱性的大范畴pH值的缓冲液;

2.对生物化学过程干扰非常小,不与钙离子及重金属离子产生沉积。

其劣势是:

1.缓冲液的pH值受溶液浓度干扰比较大,缓冲液稀释10倍,pH值的变动大于0.1;

2.温度效应大,温度变动对缓冲液pH值的干扰较大,比如4℃时缓冲液的pH值为8.4,则37℃时的pH值为7.4,因此 一定要在应用温度下开展配置,常温下配置的Tris-HCl缓冲液不可以用以0~4℃;

3.易吸附空气中的C02,因此 配置的缓冲液需盖严密封;

4.此缓冲液对一些pH电极产生相应的干扰效果,因此 要应用与Tris溶液具有兼容性的电极。

三、硼酸盐缓冲液

常见的合理有效pH范畴是:pH值为8.5~10.0,因此它是碱性范畴内最常见的缓冲液

优势是配置便捷,只应用一类实验试剂,劣势是能与很多代谢产物形成络合物,尤其是能与糖类的短基反应生成稳定的复合物而使缓冲液受到干扰。

四、氨基酸缓冲液

此缓冲液应用的范畴宽,可用以pH值为2.0~11.0,比如最常见的有:

甘氨酸-HCl缓冲液:pH值为2.0~5.0。

甘氨酸-NaOH缓冲液:pH值为8.0~11.0。

甘氨酸-Tris缓冲液:pH值为8.0~11.0(此缓冲液用以普遍应用的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的电极缓冲液)。

组氨酸缓冲液:pH值为5.5~6.5。

甘氨酰胺(glycineamide)缓冲液:pH值为7.8~8.8。

甘氨酰甘氨酸(glycylglycine〉缓冲液:pH值为8.0~9.0。

该类缓冲体系的优势是:为细胞组分和多种提取液给予更贴近的纯天然环境。

其劣势是:①与羧酸盐和磷酸盐缓冲体系类似,也会干扰一些生物化学反应过程,如代谢过程等;②实验试剂的价格较高。

相关推荐:磷酸盐缓冲液TrisHCl缓冲液组氨酸

点赞图片
  • 暂无回复...

登录后才可以评论

立即登录
发表评论
楼主动态
相关推荐
推荐标物
请告知您的电话号码,我们将立即回电

通话对您免费,请放心接听

温馨提示:

1.手机直接输入,座机前请加区号 如13803766220,010-58103678

2.我们将根据您提供的电话号码,立即回电,请注意接听

3.因为您是被叫方,通话对您免费,请放心接听

请设置您的密码:
分享到微信