骨碎补是水龙骨科植物槲蕨Ｄｒｙｎａｒｉａｆｏｒｔｕｎｅｉ（Ｋｕｎｚｅ）Ｊ．Ｓｍ．的干燥根茎，为我国常用中药。其可疗伤止痛、补肾强骨，外用亦可消风祛斑；临床上主要用于跌扑损伤、筋骨折伤、肾虚腰痛、筋骨痿软、耳鸣耳聋、牙齿松动等，外治斑秃和白癜风等。除２０１５年版《中国药典》收载的骨碎补外，历代文献中记载的骨碎补习用品有来源于３个科６个属的１０余种药用植物。

目前从骨碎补中分离所得的化学成分主要涉及黄酮、三萜、酚酸及其的苷类等，现行的药典规定用高效液相色谱法测定其中主要成分柚皮苷的含量以控制其质量。本课题通过对比不同文献与药典记载的提取方法及实验结果，选用微波提取法和具有创新性的实验型闪式提取器在不同实验条件下对同一种类骨碎补进行有效成分的提取，并对提取效率进行对比；同时对五种不同品种的骨碎补通过提取器经相同条件提取其中有效成分，进行柚皮苷含量大小的比较，旨在为骨碎补药材的开发与利用提供科学依据。

１ 仪器与试剂

１.１ 仪器

ＬＣ－Ａｇｉｌｅｎｔ１１００型高效液相色谱仪；中草药粉碎机（ＦＷ１３５）；实验型闪式提取器（ＪＨＢＥ－５０Ｖ）；ＭＥ２０４Ｅ／０２电子天平；ＫＱ－５２００Ｂ超声仪；ＸＨ－１００Ａ微波催化合成／萃取仪；甲醇为色谱纯（Ｆｉｓｈｅｒ），乙腈为色谱纯（Ｆｉｓｈｅｒ），甲酸为分析纯，水为二次重蒸水。

１.２ 材料

柚皮苷标准品购自成都普菲德生物技术有限公司（纯度≥９８％）；骨碎补药材由云南中医药大学提供，药材均由云南中医药大学民族医药学院尹子丽老师鉴定。

２ 方法与结果

２.１ 色谱条件与系统适应性试验

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈－０.０８８％甲酸水溶液（２３.３∶７６.７）；流速：０.９ｍＬ／ｍｉｎ；温度：室温；检测波长：２８３ｎｍ，理论板数按柚皮苷峰计算应不低于３０００。

２.２ 对照品溶液的制备

精密称取柚皮苷标准品６.３ｍｇ，用甲醇溶解并于１００ｍＬ量瓶中定容，制成６３.０μｇ／ｍＬ的柚皮苷溶液，即得。

２.３ 供试品溶液的制备

２.３.１ 微波法

选取一种骨碎补样品（鳞轴小膜盖），用粉碎机粉碎３次，每次１０ｓ。称取药材粗粉约０.５０ｇ，精密称定，置于三口烧瓶中。根据文献和实际操作，加入甲醇∶水＝２∶１的甲醇水溶液１５０ｍＬ，微波协助提取７０℃，保温８ｍｉｎ（每分钟暂停搅拌一下以保证有效成分充分溶解），取出，冷却至室温，摇匀，用０.４５μｍ微孔滤膜滤过，取续滤液。