诱惑红合成着色剂作为一种添加剂广泛用于食品中，国家对其使用有明确的限量标准，我国添加剂卫生标准GB2760规定诱惑红可用于糖果、冷饮、固体饮料等，近年又增补标准用于肉灌肠、西式火腿等，对其的检测也显得越来越重要。目前国标的检测方法(GB／T5009．141-2003)为纸色谱法，程序繁杂，操作时间长，灵敏度不高，难以准确定量，且对肉制品等未给出样品前处理方法。当遇到含有多量蛋白质、脂肪等固体样品时如肉制品，按国标法色素提取样品回收率低。

本文在原有提取色素基础上加以改进，能较好地将样品中诱惑红吸附提取，采用现有仪器设备，高效液相色谱一紫外检测器检测，从而大大提高检测的灵敏度、精密度和准确度。本方法可以用于测定肉制品中诱惑红含量。

1材料与方法

1．1仪器与试剂

1．1．1仪器

BIO—TEK高效液相色谱仪；522泵；535紫外检测器；AnaStar色谱工作站。

1．1．2试剂

石油醚(AR)；无水乙醇(AR)；氨水(AR)；亚铁氰化钾(AR)；乙酸锌(AR)；聚酰胺粉(2oo目)；柠檬酸(AR)；甲酸(AR)；乙酸(AR)；甲醇(色谱纯)；乙酸铵(AR)。以上试剂购于天津市永大化学试剂开发中心。诱惑红标准液1001xg／ml(国标中心)。实验用水均为去离子水。

1．1．3色谱条件

ODS—C柱，流动相：甲醇+0．02mol／L乙酸铵，比例35：65，流速：1．0ml／min，柱温30~(2，波长：254nm。标准与样品均进样201．d，保留时间定性，外标峰面积法定量。

1．2方法

1．2．1样品处理

取10．0克绞碎均匀样品于lOOml具塞闭色管中，加石油醚浸泡样品，浸泡片刻去除油脂，共提三次，吹干。加入乙醇一氨一水解吸色素，超声10min，解吸液于烧杯中，共提三次。加人乙酸锌、亚铁氰化钾溶液各2．5ml沉淀蛋白，过滤于蒸发皿中，用乙醇一氨一水冲洗过滤纸至无色。水浴挥去氨，调pH至酸性。用聚酰胺吸附法提取色素，去离子水定容至5．0ml供测定。

1．2．2标准曲线

准确吸取诱惑红标准液0．200ml、1．00ml、2．50ml、5．0ml于10．0ml具塞比色管中去离子水定容至刻度。浓度为0．002、0．01、0．025、0．05、0．1mg／ml(诱惑红标准液)标准系列，分别进样20μl，以峰面积对浓度作图获得标准曲线。Y=16207388X+985，R=0．9999。