随着水产饲料业的高速发展，鱼粉资源的不断枯竭，加上近年来国内外陆生养殖动物流行病害严重，动物蛋白源如肉骨粉、禽肉粉、血浆制品等的使用受到严重限制。

棉粕是我国除豆粕之外常用的替代鱼粉的植物蛋白源，因此棉粕的开发利用是解决我国蛋白质资源短缺的主要途径之一。RobinsonPH(2001)、Singhal,K.K.(2006)等报道，因棉粕含有对单胃动物有毒的游离棉酚，其利用价值和使用量受到很大限制，国内外有关研究人员对微生物固体发酵棉粕的研究主要集中在筛选高效脱毒菌株方面，并取得了一些研究成果，但研究人员对微生物发酵处理棉粕后其营养成分变化研究很少。

在前人研究基础上采用由枯草芽抱杆菌（Bacillussubtilis)、纳豆芽抱杆菌(Bacillussubtilisnatto)、地衣芽抱杆菌（Bacilluslicheniformis)、錯状芽抱杆菌(Bacilluscereus)、丁酸梭状芽抱杆菌(Clostridiumbutyricum)及酵母菌(Saccharomycescerevisiae固体发酵棉粕，生产棉粕蛋白饲料，通过单因素试验和正交优化试验，对其发酵产物各营养成分进行研究，确定其最佳发酵工艺。本研究试图找到一种不仅能避免化学添加剂和物理法对棉籽蛋白质功能性质的影响，还会改善适口性，提高蛋白质、氨基酸含量，既安全又可降低成本，具有很好发展潜力的一种有效方法，为棉粕发酵的工业化生产提供理论依据。

1材料与方法

1.1试验材料

1.1.1发酵菌种

经鉴定，主要由枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、丁酸梭状芽孢杆菌及酵母菌组成。粉末状固体，活菌数>1010CFU.g-1。

1.1.2发酵原材料

棉粕、麦麸由湖南省湘北水产饲料有限公司提供。粉碎至20目，棉粕含游离棉酚含量505mg/Kg、粗蛋白含量41.25%c、总游离氨基酸含量3.73%曰麦麸粗蛋白含量16.46%、总游离氨基酸含量1.23%。

1.1.3培养基

斜面培养基：牛肉膏0.5%袁蛋白胨1%，NaC10.5%，琼脂1.5-2.0%，pH7.0-7.2，12rC灭菌25min。液体种子培养基:牛肉膏0.5%，蛋白胨1%，NaCl0.5%，葡萄糖5%，pH7.0-7.2，121C灭菌25min。发酵培养基：棉粕、麦麸分别占发酵底物的80%、20%，葡萄糖2%，（NH4)2SOJ%，固水比1:0.5，pH7.0。

1.2试验方法

1.2.1菌种培养

斜面菌种培养：将保存于冰箱的斜面种子接种于新鲜斜面培养基上，37C恒温培养36h。液体种子培养:将培养36h的斜面种子分别接种于液体种子培养基中，37C，150r/min条件下振荡培养18h-24h。发酵培养:按5%的接种量(V/W)接种于装量为50g/250mL三角瓶发酵培养基中，混合均匀后，置于30C恒温培养箱中培养5d，培养过程中从培养开始每24h摇动1次。

1.2.2单因素条件研究

培养方法与1.2.1相同，替换不同的条件，如棉粕与麦麸的比例、葡萄糖含量、(NH4)2SO4添加量、发酵温度、初始pH值、含水量、接种量、发酵时间、装量等，测定不同条件下各营养成分的变化情况。每处理3个重复。