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狗牙花生物碱成分分析

大C-会员头像-www.bzwz.com标准物质网 大C 0 402 2021-07-30
【摘要】目的:对夹竹桃科狗牙花属植物中狗牙花的生物碱类化学成分进行分离并对分离得到的化合物进行结构鉴定。方法:将干燥狗牙花3.5kg粉碎,加甲醇室温渗漉提取,收集渗滤液,将渗滤液减压浓缩得到浸膏。浸膏用2mol·L-1硫酸调节pH2,加入乙酸乙酯萃取得到非碱性脂溶性成分浓缩物;萃取后的酸水液用氢氧化钠溶液调节pH9~10,然后用三氯甲烷萃取,得到总生物碱10g。通过硅胶柱色谱,小孔凝胶(MCI)柱色谱和LH-20羟丙基萄聚糖凝胶(SephadexLH-20)柱色谱进行分离和重结晶技术纯化,应用TLC监测,分离得到纯度较高的单体化合物。利用现代波谱法结合理化分析对其化学结构进行进一步鉴定。结果:从狗牙花中共分离得到并鉴定了6个单吲哚生物碱,分别鉴定为ervaramine型:ervatamine(1),20-epiervatamine(3);vobasine型:tabernaemontanine(2),dregamine(4);aspidosperma型:(-)-mehranine(5),tetrahydroalstonine(6)。结论:化合物4,6为首次从该植物中分离得到。MTS法测定化合物的肿瘤细胞毒活性,化合物1~6对5种人体肿瘤细胞株(人早幼粒白血病细胞HL-60,人肝癌细胞SMMC-7721,人肺癌细胞A-549,人乳腺癌细胞MCF-7,人结肠癌细胞SW-480)未显示出细胞毒活性。
  • 狗牙花又名白狗花、狮子花,为夹竹桃科狗牙花属植物,在亚洲热带和亚热带(孟加拉国、不丹、印度、缅甸、尼泊尔、泰国等)均有野生及栽培。狗牙花根茎含生物碱、苷类等成分。茎、叶的甲醇提取物可用于治疗胃癌疼痛、降低血压功效。在广东、广西等省区民间用根、叶和花治疗毒蛇咬伤等。现代医学研究发现根可以用来治疗高血压、头痛、和疥疮等疾病。

    目前对狗牙花研究的热点几乎都集中在生物碱类化学成分,单吲哚类生物碱包括coronaridine,voacangine,voaphylline,lochnericine,tabernaricatinesFandG,19,20-didehydro-6α-hydroxyervatamine等,而双吲哚类则有tabernaricatinesA~E,19,20-dihydrotabernamine,19,20-dihydroervahanine,conodurine,tabernaelegantine等。

    文献报道显示,狗牙花的生物碱提取物和生物碱类单体成分具有显著的生物活性,包括乙酰胆碱酯酶抑制活性、细胞毒活性。鉴于狗牙花中生物碱类化学成分多变的骨架结构和多样的生物活性,为全面研究其药理作用的物质基础,开发狗牙花的药用价值,对其生物碱成分进行了研究。

    通过硅胶柱色谱,MCI柱色谱和LH-20羟丙基葡聚糖凝胶(SephadexLH-20)柱色谱分离纯化方法从总碱中分离并鉴定了6个单吲哚生物碱,利用现代波谱法结合理化分析,并与文献对照鉴定其结构分别为ervaramine-types(1,3),vobasine-types(2,4),aspidosperma-types(5,6)。化合物4,6为首次从该植物中分离得到。化合物1~6进行5种人体肿瘤细胞株(人早幼粒白血病细胞HL-60,人肝癌细胞SMMC-7721,人肺癌细胞A-549,人乳腺癌细胞MCF-7,人结肠癌细胞SW-480)抑制活性筛选,但未显示出细胞毒活性。

    1材料

    AM-500型核磁共振仪(瑞士Bruker公司),N-1100型系列旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司),A-1000S型水流抽气机(上海爱朗仪器有限公司)。

    高效薄层色谱硅胶G板(烟台化工研究院),80~100目柱色谱硅胶,200~300目柱色谱硅胶和色谱硅胶H(青岛海洋化工厂),反相RP-18(40~60μm,德国Merck公司),薄层色谱硅胶GF254(青岛海洋化工厂),SephadexLH-20(20~80μm;美国Pharmacia精细化工公司)。所用洗脱溶剂均为工业纯,使用前经过重蒸,其他试剂为分析纯。狗牙花枝、叶采自云南勐腊,由中国科学院西双版纳热带植物园周仕顺实验员鉴定为夹竹桃科植物狗牙花Tabernaemontanadivaricata,标本保存于云南师范大学化学化工学院(No.130412)。

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