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邻苯二甲酸酯(PAEs)是一类常用的塑化剂,可增加塑料的柔韧性和强度,因此广泛应用于食品包装、儿童玩具、化妆品、纺织品和生物医学设备等软质塑料中PAEs可通过多种途径污染环境,如大气、饮用水、土壤、食品包装材料等,土壤中的塑化剂主要来源于农膜及其他废弃塑料制品的携入。PAEs及其代谢产物和降解产物对人体健康的危害很大,不但会损伤人体肝脏、肾脏、生殖器官,还会干扰人体正常内分泌,影响体内荷尔蒙含量,长期在体内积累还可能会导致畸形、癌变和细胞突变美国环保署将6种PAEs列为优先控制的重点污染物.包括邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁基节酯(BBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、邻苯二甲酸二辛酯(DNOP)。
塑化剂的测定主要集中在塑料容器以及塑料包装材料中,但近年来,一些不法商贩利用塑化剂的增塑特点将塑化剂代替起云剂和乳化剂加入到食品,甚至药品中刀。对土壤中塑化剂的测定及其生物有效性的同步研究较少。土壤中的PAEs能够被植物和无脊椎动物吸收,并通过食物链在动物和人体内累积,食物中的污染物从食品基质中释放后进入消化液,由上皮细胞转入静脉.继而转移到靶器官发挥毒性作用。
体外胃肠模拟法可以利用人工配制的消化液,模拟人体的胃和肠的消化过程来分析污染物的生物有效性通常只有部分有机污染物溶解在胃肠液中,这部分被认为是可能被人体吸收,即生物有效态的部分。测定土壤中有机污染物的生物有效性对评价其暴露风险至关重要。本工作以体外胃肠模拟法为基础,分析土壤中PAEs的生物有效性,为评价其健康风险和污染管控提供依据。
1试验部分
1.1仪器与试剂
Ultimate3000型高效液相色谱仪,配可变波长紫外检测器;梅特勒S220型pH计;0.45“m有机过滤膜。6种PAEs混合标准储备溶液:100mg。胃液:称取1.25g胃蛋白酶,0.50g苹果酸钠,0.50g柠檬酸钠,加入420乳酸和500“L乙酸溶解后,用乙酸定容至1.000L,并用50%(体积分数)盐酸溶液调节pH至2.5叫甲醇、乙睛均为色谱纯,其他试剂均为分析纯,试验用水为超纯水。
1.2色谱条件
ZorbaxEclipseC*色谱柱(4.6mmX250mm,5.0”m),柱温40°C;进样体积20^L;流量1mL•min"1;测定波长245nmo流动相:A为乙睛,B为水。梯度洗脱程序:0~5min时,A为70%;6~10min时,A由70%升至95%,保持10min。
1.3试验方法
1.3.1样品前处理分别称取10.000g土壤样品于2个50mL玻璃瓶中,第一份样品中加入10mL胃液,在37°C下,以100r•min-1转速振荡提取1h,模拟胃液的消化过程。胃液提取结束后,用碳酸氢钠(粉末)调节消化液pH至7.0,加入55.0mg胆汁盐和15mg胰液素即得肠液,然后在37°C下,以100r•min-1转速继续振荡2h,完成肠液的提取。提取结束后,以4000r•min-'转速离心3min,取上清液加入10mL甲醇,超声提取30min。按同样方法操作进行空白试验。另一份样品中加入10mL甲醇,超声提取30min,按同样方法操作进行空白试验。反应结束后向两份提取液中加入足量硫酸镁和氯化钠.以4000r•min'1转速离心3min,取上清液定容至10.0mL,经0.45“m有机滤膜过滤后按色谱条件进行测定。
1.3.2生物有效性计算污染物的生物有效性的计算见公式(1):2b=p\/piX100%(1)式中:zb为污染物的生物有效性;0为污染物从基质中释放到胃肠模拟液中的质量浓度,mg•L-1;^为基质中污染物的总质量浓度,mg-L-'o
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