1.花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)产毒菌株的选择；(2)空白和产毒花生品种的选择；(3)花生样品的处理与产毒监测；(4)基体混合与制备；(5)样品表征与均匀性检查。

2.根据权利要求1所述的花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法，其特征在于：所述步骤(1)具体为，于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)购得一株菌种保藏编号为CGMCCNo3.4408的黄曲霉(Aspergillusflavus)菌株，经花生产毒实验证实，该菌株可在花生上高效产生黄曲霉毒素B1。

3.根据权利要求2所述的花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法，其特征在于：所述步骤(2)具体为，对花生的含油量、油酸、亚油酸含量等分别进行检测；对不同品种花生进行脱壳、水浸后脱红衣处理，高压蒸汽灭菌锅110℃下灭菌待用；将所购菌种的孢子悬浮液稀释制备成所需浓度的悬浮液；每500g花生接种50ml孢子悬浮液，使悬浮液与花生外表均匀、充分接触；于28℃、85％湿度下培养，并利用酶联免疫快速检测法对花生的产毒效率进行检测；对用作基体稀释用的空白花生品种进行筛选；对用于产毒的花生品种进行筛选。

4.根据权利要求3所述的花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法，其特征在于：所述步骤(3)具体为，对选定品种的空白花生进行脱壳、水浸后脱红衣处理，45℃下烘箱中烘干至样品水活度小于0.2aw，于120℃下烘箱烘烤10分钟，其中变色样品丢弃；立即降温，真空分装待用；对选定品种的产毒花生进行脱壳、水浸后脱红衣处理，高压蒸汽灭菌锅110℃下灭杂菌，并按步骤(2)所述方法接种培养并进行产毒含量监测，根据标准物质的预期浓度水平，制得较适宜黄曲霉毒素B1浓度的产毒样品；将样品置于高压蒸汽锅中进行灭活处理，先45℃烘干，再在120℃下烘烤10分钟，立即降温，真空分装待用。

5.根据权利要求4所述的花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法，其特征在于：所述步骤(4)具体为，将产毒花生样品按适当的比例与空白花生样品混合，加入2％单甘脂作为乳化剂、200mg/kg2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚作为抗氧化剂混合；先用刀式混合仪进行预粉碎和初混，再选择适当筛网，用超离心研磨仪通过液氮-切割粉碎方法制得具有较均一粒度水平的花生样品；对样品进行真空封装，外套铝箔袋二次抽真空低温避光保存。

6.根据权利要求5所述的花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法，其特征在于：所述步骤(5)具体为，由图像颗粒分析仪观察粒度；对花生样品进行均匀性的初步考察，不同部位抽取样品，测定相对标准偏差，用于后续标准物质样品的制备。

花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法

技术领域

[0001]本发明涉及化学标准物质制备技术领域，特别是涉及一种花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法。

背景技术

[0002]黄曲霉毒素污染是食品安全中的重大问题之一，严重威胁人类健康。研制黄曲霉毒素基体标准物质是保证相关食品安全检测数据准确可靠的基础。花生种子中最为常见的黄曲霉毒素中，以黄曲霉毒素B1产毒量最大、毒性最强。由于花生具有高脂、高蛋白的特点，同时花生中黄曲霉毒素产毒菌分布不均匀，产毒不均匀，样品的均匀性和稳定性控制是标准物质研制的关键。天然染毒花生原料往往需要通过大规模样品筛查得到，由于产毒条件不可控、杂菌过多，更易导致产毒不均匀，样品的均匀性与稳定性难以控制，在样品的可获得性、样品量、样品浓度控制等方面也存在诸多局限。因此，需要开发新的标准物质制备技术。

发明内容

[0003]本发明的目的是提供一种花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法。

[0004]本发明的具体技术方案如下：

[0005]花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法，包括以下步骤：

[0006](1)产毒菌株的选择；

[0007](2)空白和产毒花生品种的选择；

[0008](3)花生样品的处理与产毒监测；

[0009](4)基体混合与制备；

[0010](5)样品表征与均匀性检查。

[0011]本发明所述的花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法，其中，所述步骤(1)具体为，2017年8月17日于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)购得一株菌种编号为CGMCCNo3.4408的黄曲霉(Aspergillusflavus)菌株，经花生产毒实验发现，该菌株可在花生上高效产生黄曲霉毒素B1。

[0012]本发明所述的花生中黄曲霉毒素B1基体标准物质制备方法，其中，所述步骤(2)具体为，对花生的含油量、油酸、亚油酸含量等分别进行检测。不同品种的花生脂肪、蛋白质含量不同。花生中含有油酸、亚油酸等多种脂肪酸，其中油酸和亚油酸含量相对较高。相对于亚油酸，油酸是性质更稳定的物质，无需氢化也可长久保存。油酸含量高的花生则稳定性强，有利于长期保存。