北方伟业计量集团有限公司
1.一种色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒,其特征在于,包括第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管、第四试剂管和第五试剂管;所述第一试剂管内装有N-乙基马来酰亚胺(NEM)的磷酸缓冲溶液,所述第二试剂管内装有4-叔丁基苯硫酚(tBBT)的二甲基亚砜溶液,所述第三试剂管内装有三(2-羧乙基)膦(TCEP)的硼酸缓冲溶液,所述第四试剂管内装有5-氨基异喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AIQC)的乙腈溶液,所述第五试剂管内装有甲酸溶液;其中:所述第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管、第四试剂管和第五试剂管均包括管体、管盖、和设置于所述管体管口处的韧性密封膜;所述密封膜与所述管口经固定点固定连接,并与所述管口具有相亲和的凝胶圈,所述密封膜沿所述管口外沿还具有用于启封的凸起。
2.如权利要求1所述的色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管、第四试剂管和第五试剂管各1支。
3.如权利要求1或2所述的色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒,其特征在于,所述第一试剂管为10mL的样品瓶。
4.如权利要求1或2所述的色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒,其特征在于,所述第二试剂管为2mL的样品瓶。
5.如权利要求1或2所述的色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒,其特征在于,所述第三试剂管为100mL的样品瓶。
6.如权利要求1或2所述的色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒,其特征在于,所述第四试剂管为30mL的样品瓶。
7.如权利要求1或2所述的色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒,其特征在于,所述第五试剂管为2mL的样品瓶。
8.如权利要求1所述的色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒,其特征在于,所述凸起为舌型或者环形。
9.如权利要求1所述的色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒,其特征在于,所述密封膜材质为塑料。
10.如权利要求1所述的色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒,其特征在于,还包括衬垫,所述衬垫设有小孔,所述第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管、第四试剂管和第五试剂管均嵌插在所述衬垫的小孔内。
一种色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒
技术领域
[0001]本实用新型属于分析化学领域,更具体地,涉及一种色谱质谱检测氨基代谢物样本配置试剂盒。
背景技术
[0002]色谱质谱被广泛用于生物样本的靶向精准定量检测,而氨基代谢物是一类具有生物活性含氮的低分子量有机化合物,包括常见20种蛋白氨基酸、含巯基和二硫键氨基酸、多肽、儿茶酚胺、其它氨基酸及基衍生物、其它生物胺等,往往具有非常重要的生理功能,定量精准检测生物样品中氨基代谢物对于生物研究和疾病标记物的发现非常重要,科研院所对该项检测的需求也非常迫切。目前市面上已有多种氨基酸商业化分析方法,主要是基于液相色谱质谱的方法,但仍存在若干不足:
(1)使用2,4-二硝基氯苯以及2,4-二硝基氟作为衍生化试剂,其衍生条件复杂苛刻,产物不稳定;
(2)使用丹磺酰氯作为衍生化试剂,其衍生条件难以控制,对溶液环境pH值敏感,衍生产物不稳定,专一性差;
(3)使用邻苯二甲醛(OPA)作为衍生化试剂,只能检测伯胺基氨基酸,不能检测脯氨酸类仲胺基氨基酸,且产物极不稳定;
(4)使用9-氯甲酸芴甲酯(FMOC-Cl)作为衍生化试剂,FMOC-Cl水解产物FMOC-OH有荧光干扰,组氨酸和酪氨酸单、双衍生物比例不稳定,影响定量;
(5)使用异硫氢酸苯酯(PITC)作为衍生化试剂,专属性差,需要排除水的干扰,不适用于水溶性样品的检测;
(6)对于还原型含巯基氨基代谢物和对应的氧化型含二硫键氨基代谢物的检测需要分两次进行。按照JinWang等,ScientificReports,2017,7(1423),1-16文中所述方法使用5-氨基异喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AIQC)作为衍生化试剂,配合使用N-乙基马来酰亚胺(NEM)磷酸缓冲溶液、4-叔丁基苯硫酚的二甲基亚砜溶液、三(2-羧乙基)膦(TCEP)的硼酸缓冲溶液和甲酸溶液能克服以上缺点,并大幅提高检测灵敏度。由于色谱质谱灵敏度非常高,在操作过程中化学试剂保存不当、不精准移取,以及化学试剂在移取过程中的挥发和污染,都会很大程度影响检测结果的准确性。而目前市面上无此种商用试剂盒,极大地限制了生物样本的高通量、高准确性定量检测氨基代谢物。
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