北方伟业计量集团有限公司
1.一种采用高效液相色谱法测试食品中食品添加剂的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)混合标准系列工作溶液的制备:分别称取标准物质安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸,转移至容量瓶,加甲醇溶解再加水定容至刻度,得到的混合标准溶液用水逐级稀释后得到混合标准系列工作溶液;
2)待测液的制备:第一步,将称取的样品加入具塞离心管中,加水后涡旋混匀,超声提取,然后加入亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液,混匀,离心后移出上清液至容量瓶中,得到剩余残渣;第二步,向第一步获得的剩余残渣中加入水,超声提取,离心后将上清液移入第一步的容量瓶中,用水定容至刻度,过滤,得到待测液;
3)测定:用带有DAD检测器的高效液相色谱仪对混合标准系列工作溶液和待测液进行测试,采用梯度洗脱,并在变波长下进行检测,其中,高效液相色谱仪的流动相为0.02mol/L乙酸铵溶液与甲醇梯度混合的混合液,其中乙酸铵溶液中加有体积分数为1%的乙酸溶液,并且乙酸铵溶液与乙酸溶液的质量比为(350-450):1,以混合标准系列工作溶液的浓度为横坐标,5种添加剂对应的色谱峰的峰面积为纵坐标绘制标准曲线;测定待测液的色谱峰的峰面积,根据标准曲线得到待测液中5种添加剂的质量浓度。
2.根据权利要求1所述的采用高效液相色谱法测试食品中食品添加剂的方法,其特征在于:第一步中,若样品为果冻、糖果,样品称样后,需加水稀释,再加热溶解。
3.根据权利要求1所述的采用高效液相色谱法测试食品中食品添加剂的方法,其特征在于:第一步中,若样品为酒或碳酸饮料,样品称样后需先加热除去乙醇和碳酸。
4.根据权利要求1所述的采用高效液相色谱法测试食品中食品添加剂的方法,其特征在于:若样品为高油脂样品,则第一步为:对样品进行称样,然后将样品加入正己烷并水浴加热,溶解脂肪后加氨水溶液和乙醇混匀超声提取,冷却至室温后再加入亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液混匀,离心后将水相转入容量瓶中,得到剩余残渣;第二步为:向第一步获得的剩余残渣中加入水混匀,超声提取,离心后将水相移入第一步的容量瓶中定容至刻度。
5.根据权利要求1所述的采用高效液相色谱法测试食品中食品添加剂的方法,其特征在于:第二步所述过滤是将定容后的溶液通过直径为0.22μm的聚醚砜滤膜过滤到样品瓶中。
6.根据权利要求1所述的采用高效液相色谱法测试食品中食品添加剂的方法,其特征在于:第一步中,超声提取的持续时间为10min-1h,离心的转速为5000r/min-10000r/min,离心的时间为5min-10min;第二步中,超声提取的持续时间为10min-30min,离心的转速为5000r/min-10000r/min,离心的时间为5min-10min。
7.根据权利要求1所述的采用高效液相色谱法测试食品中食品添加剂的方法,其特征在于:高效液相色谱仪的色谱柱为C18柱,250mm×4.6mm,色谱柱内的填料的粒径为5μm。
8.根据权利要求1所述的采用高效液相色谱法测试食品中食品添加剂的方法,其特征在于,梯度洗脱的程序如下表:
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