胡椒碱（Piperine）又名1-胡椒酰哌啶（1-Piperylpiperidine）（结构式见图1），属于桂皮酞胺类生物碱，具有降血脂、抗肿瘤、抑制寄生虫病、抗胃溃疡、抗氧化、抗炎症、抗白癜风和抗脑血管痉挛等作用。分子式为C17H19NO3，化学结构式见图1。

早在1819年，Oersted等首次从胡椒中提取得到了一种黄色结晶状物质胡椒碱，它是胡椒中含量最大的生物碱，是胡椒的主要辛辣成分，也是胡椒中活性最高的成分。我们通过前期的研究发现胡椒碱具有一定的降脂作用，但因毒性较大，水溶性差导致其生物利用度低，限制了其临床应用开发，所以对其进行化学结构的改造，用以降低胡椒碱的毒性，增加其生物利用度。因此，通过水解、酰胺化反应，固相水解等过程得到氨基酸酯修饰的胡椒碱氨基酸衍生物，为后续的药理研究提供实验原料。

1实验部分

1.1试剂与仪器

胡椒碱：纯度＞95%，陕西泰克生物科技有限公司；Ｌ-缬氨酸乙酯盐酸盐：纯度＞98%，上海研拓生物科技有限公司；二氯亚砜（SO2Cl2）、中性氧化铝（Al2O3）：75~150μｍ；二氯甲烷（DCM）：分析纯、三乙胺（TEA）：分析纯；石油醚（PE）：分析纯；甲醇，无水乙醇，氟化钾（KF），乙酸乙酯（EA）：分析纯，盐酸：分析纯，碳酸氢钠：分析纯，氢氧化钾（KOH）：分析纯，Sigma–Aldrich公司。硅胶板60F254，Merck；核磁共振仪Advance400，Bruker；高效液相色谱D-2000Elite，Hitachi；电子天平PL2002，MettlerToledo；旋转蒸发仪N-2100，Eyela；集热式恒温加热磁力搅拌器ETS-D5，IKA；真空泵VG130，SPECK。液质联用仪ABSCIEXTripleTOF™5600系统，ABSCIEXTechnologies，美国。

1.2实验方法

胡椒碱氨基酸衍生物的合成路线见图2。Scheme1Reagentsandconditions：（i）KOH，ethanol，reflux，12h；HCl（ii）SOCl2，DCM，reflux，12h（iii）DCM，（2a-2j），Et3N，rt，2h（iv）KF-Al2O3，50℃，2h

1.2.1胡椒酸的合成胡椒碱（64g，219.9mmol），加入95%乙醇（1.5L），搅拌情况下加入氢氧化钾白色固体（113.5g，17.9mmol），加热搅拌回流12h，TLC跟踪检测至原料反应完全。静置冷却，减压抽滤，将滤饼用无水乙醇洗三次至pH=7左右，减压抽滤，于50℃时干燥12h，得棕褐色胡椒酸钾盐晶体。将烘干后的胡椒酸钾盐用水溶解，此时溶液为棕黄色透明液体，减压抽滤，除去不溶物，滤液用盐酸（1∶1）酸化至pH=1~2，产生淡黄色黏稠状液体，静置，抽滤，滤饼用去离子水洗至中性后抽滤，滤饼于烘箱中90℃时干燥24h，得到淡黄色固体。

1.2.2胡椒酸氨基酸酯化合物的合成胡椒酸（2.18g，10mmol），加入干燥的二氯甲烷溶解，然后加入二氯亚砜（73.8mmol，14.4mL），氮气保护加热回流2h，减压蒸馏得到胡椒酸酰氯固体。将得到的胡椒酸酰氯溶解在干燥的二氯甲烷中，随后加入氨基酸酯（20mmol）搅拌溶解，在0℃条件下缓慢加入三乙胺，室温搅拌，TLC跟踪反应，反应完成加入水，有机层用水（2*25mL）萃取，然后用无水硫酸钠干燥，得到粗产物。粗产物纯化：将粗产物尽量少的溶解在乙酸乙酯中，然后缓慢加入正己烷，直至溶液变浑浊，室温静置得到胡椒酸氨基酸酯晶体。