我院名老中医马贵同教授经过多年的临床实践总结出了医院制剂清肠栓(沪药制字Z05170722)。该方基于溃疡性结肠炎“湿热瘀互结肠道”的关键病机，以清热化湿、活血止血立法，在锡类散、青黛散治疗黏膜溃疡的基础上优化筛选而来，主要由三七、青黛、五倍子、马齿苋、冰片等中药制备组成。方中，马齿苋和青黛清热解毒，三七活血化瘀，五倍子收湿敛疡，共奏清热解毒，化瘀止血，祛腐生新愈疡之功。全方药少力专，具有止痛、止血、止泻的作用，亦具有预防作用。栓剂剂型的设计，相比较于传统口服剂型，可以有效避免首过效应，提高局部药物浓度。多年临床实践证明清肠栓在治疗特异性肠炎，尤其是溃疡性结肠炎方面有良好的疗效。

五倍子(ＲhuschinensisMill)为同翅目蚜虫科的角倍蚜或倍蛋蚜雌虫，寄生于漆树科植物盐肤木及其同属其他植物的嫩叶或叶柄，刺伤而生成一种囊状聚生物虫瘿，经烘倍干燥后所得。没食子酸是五倍子的主要成分之一，具有抗氧化、抗病毒、抑菌等功效;青黛为爵床科植物马蓝、蓼科植物蓼蓝或十字花科植物松蓝的叶或茎叶经加工制得的干燥粉末、团块或颗粒，具有抗菌、抗病毒的作用，并对疮面有愈合作用，主要含有靛蓝和靛玉红。

现在已有对清肠栓中三七皂苷Ｒ1、人参皂苷Ｒg1、人参皂苷Ｒb1进行含量测定，本研究则着重于用UPLC方法对清肠栓中五倍子成分中的没食子酸以及青黛中的靛蓝和靛玉红进行测定，以进一步为清肠栓的质量控制提供依据，并确保用药安全。

1仪器与试剂

1．1仪器

离心机(TGL－16G，80－2);水浴锅(精宏XMTD－8222);超高相液相色谱仪(Agileny1100UPLC);色谱柱:Agilent－ExtendC185μm4．6×150mm，超声机(上海安谱仪器有限公司2200T)。

1．2试剂

靛蓝对照品(成都曼斯特公司，MUST－17042310)，靛玉红对照品(成都曼斯特公司，MUST－17041401)，没食子酸对照品(永辉生物有限公司，批号20130202)。三七、五倍子、马齿苋和青黛购自上海康桥中药饮片有限公司。清肠栓为本院自制。乙腈为色谱纯(默克中国科技公司);水为超纯水;其他试剂均为分析纯。

2方法与结果

2．1色谱条件

Agilent－ExtendC18色谱柱(5μm，4．6×150mm)。没食子酸:流动相0．5%磷酸水溶液∶乙腈=97∶3;检测波长203nm;体积流量0．3mL·min－1;柱温30℃。靛蓝、靛玉红:流动相水∶乙腈=35∶65;检测波长290nm;体积流量0．3mL·min－1;柱温30℃。

2．2对照品溶液配制

精密称取没食子酸对照品适量，加甲醇制成0．20g·L－1的对照品溶液。精密称取靛蓝对照品5．90mg，制成0．59g·L－1的对照品溶液。精密称取靛玉红对照品5．62mg，制成0.56g·L－1的对照品溶液。

2．3供试品溶液配制

将1．9g(1枚)清肠栓加入10mL甲醇(用于没食子酸成分测定)或N，N二甲基甲酰胺(用于靛蓝、靛玉红成分测定)中，超声30min后，4000rpm离心5min，取上清液，放置于4℃冰箱过夜，取出后再4000rpm离心5min，取上清液，并用0．22μm滤头过滤，备用。

2．4没食子酸、靛蓝和靛玉红专属性实验

按照2．3项下方法制备供试品溶液，分别吸取对照品溶液以及供试品溶液1μL，进样分析，结果表明清肠栓中没食子酸以及靛蓝、靛玉红得到了良好的基线分离。见图1、图2。

2．5没食子酸、靛蓝和靛玉红线性关系考察

精密吸取2．2项下没食子酸以及靛蓝和靛玉红对照品溶液1μL、2μL、4μL、8μL、10μL，在2．1项色谱条件下进样，以峰面积(Y)对应进样量(μg，X)线性回归，结果表明:在所测定的浓度范围内，3个化合物均有良好的线性关系。见表1。

2．6没食子酸、靛蓝和靛玉红精密度实验

精密样品溶液，重复进样6次，测得没食子酸、靛蓝和靛玉红峰面积ＲSD分别为1．26%，2．09%和2．68%，说明仪器精密度良好。见表2。