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【分享】液相色谱色谱图异常问题解析(三)

赵凤云-会员头像-www.bzwz.com伟业计量
赵凤云 2018-11-29 08:37 评论( 4 ) 浏览( 8913 )

十、鬼峰
可能的原因 : 解决方法
1.进样阀残余峰 : 每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗
2.样品中未知物 : 处理样品
3.柱未平衡 : 重新平衡柱,用流动相作样品溶剂 (尤其是离子对色谱)
4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱) : 每天新配,用抗氧化剂
5.水污染(反相) : 通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水
十一、基线噪声
可能的原因 : 解决方法
1.气泡(尖锐峰) : 流动相脱气,加柱后背压
2.污染(随机噪声) : 清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂
3.检测器灯连续噪声 : 更换氘灯
4.电干扰(偶然噪声) : 采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)
5.检测器中有气泡 : 流动相脱气,加柱后背压
十二、峰拖尾
可能的原因 : 解决方法
1.柱超载 : 降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相
2.峰干扰 : 清洁样品,调整流动相,使用更长的色谱柱
3.硅羟基作用 加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PH值,钝化样品
4.柱内烧结不锈钢失效 : 更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品
5.柱塌陷或形成短路通道 : 更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
6.死体积或柱外体积过大 : 连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管
7.柱效下降 : 用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱,活化色谱柱
十三、峰展宽
可能的原因 : 解决方法
1.进样体积过大 : 用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%
2.在进样阀中造成峰扩展 : 进样前后排出气泡以降低扩散
3.数据系统采样速率太慢 : 设定速率应是每峰大于10点
4.检测器时间常数过大 : 设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%
5.流动相粘度过高 : 增加柱温,采用低粘度流动相
6.检测池体积过大 : 用小体积池,卸下热交换器
7.保留时间过长 : 等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱
8.柱外体积过大 : 将连接管径和连接管长度降至最小
9.样品过载 : 进小浓度小体积样品
十四、峰分叉
可能的原因:解决方法
1.保护柱或分析柱污染:取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞,拆下来清洗。如果问题仍然存在,可能是柱子被强保留物质污染,运用适当的再生措施。如果问题仍然存在,入口可能被阻塞,更换筛板或更换色谱柱。
2. 样品溶剂不溶于流动相:改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。

点赞图片
  • 讲述了液相色谱仪器出现的鬼峰,基线噪声,峰拖尾峰展宽峰分叉等可能原因,资料不错,值得学习。
    2019-05-09 15:13:10
    0 回复(0) 收起
  • 还可能是管路漏气
    2018-11-29 09:25:55
    0 回复(0) 收起

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