俄罗斯松针油与加拿大冷杉针油挥发性成分比较与分析（一）

发布时间：2020-12-08 13:40 编辑者：周世红

松针（Pine needle）为松科（Pinaceae）植物树叶，广泛分布于全球，共有10个属约230多个品种，中国分布大约有10个属约120多种。松针资源来源主要包括黄山松、油松、红松、云南松、高山松、雪松等、白皮松、地盘松、巴山松、海南五针松、火炬松等。松针挥发油通常以针叶树嫩枝和绿叶作为原料，采用水蒸气蒸馏、超临界提取、有机溶剂等方法提取，一般松针含油量为0.4％～0.6％，多者达1％，具有杀菌、杀虫、除臭、抗氧化等多种药理活性，广泛应用于日用化工、医药和食品工业等领域。

目前，国内外关于马尾松、地中海松、加那利松、南欧黑松、樟子松、马尾松、湿地松、云南松、油松等松树种类的挥发油的成分研究已有报道，但至今未见俄罗斯松针以及加拿大冷杉针油成分对比研究报道。本实验以俄罗斯松针、加拿大冷杉针作为研究对象，采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，采用GC/MS对其成分进行了分析，经质谱检索后，匹配度结合保留指数对其定性，较好地鉴别了同分异构体或同系物，避免了在定性过程中出现误判，提高定性的准确性。另外，通过对两种不同松针精油挥发性成分进行了对比分析研究，为其在日用化工、医药和食品工业等领域应用提供了指导。

一、材料与方法

1、材料与设备

（1）材料与试剂

俄罗斯松针叶、加拿大冷杉叶：购于市场；二氯甲烷、甲醇、正己烷：GR级，购置于百灵威科技有限公司；正构烷烃C₇～C₃₀：购置于Sigma—Aidrich公司。

（2）仪器与设备

Agilent7890A/5975C气相色谱一质谱联用仪+自动进样器（美国安捷伦科技有限公司）；万分之一电子天平（瑞士MettlerTloede公司）；磨口挥发油提取仪（北京市永光明医疗仪器厂）；10mL移液器（德国Eppendorf公司）。

2、方法

（1）松针叶油提取

取新鲜针叶样品剪成0.5cm小段，称取100g置于圆底烧瓶中，加入1000 mL蒸馏水，水蒸气蒸馏法提取4 h后静置分层3h，取得针叶油为黄色油状物，用无水乙醚溶解并用无水硫酸钠进行干燥，获得松针油。

（2）松针油挥发性成分分析

准确称取松针油0.20g，用甲醇：二氯甲烷（体积比为1∶4）混合溶液稀释到10mL，进样前需要将样品用0.45μm有机相滤膜过滤，直接进GC/MS分析。色谱条件：RXi～5sil MS石英毛细管柱（60m×0.25mm×0.25μm），载气为氦气（纯度为99.99％），流速：1.0 mL/min。升温程序：初始温度50℃，保持2min；以3℃/min的速率升温至180℃再以10℃/min的速率升温至230℃，保持10min。进样口温度：250℃，进样量：1.0μL，分流比：20∶1，溶剂延迟6min。质谱条件：电轰击电离（EI）源；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；电离能量：70 eV；传输线温度：280℃；扫描范围（m/z）：40～450；质谱检索图库：NIST谱库。

（3）定性方法

移取正构烷烃C₇～C₃₀标准品，用正己烷溶液将其稀释成质量分数为5％溶液，准确称取松针油0.20g，用甲醇：二氯甲烷（体积比为1∶4）混合溶液稀释到10mL，进样前需要将样品用0.45μm有机相滤膜过滤，直接进GC/MS分析。色谱条件：RXi～5sil MS石英毛细管柱（60m×0.25mm×0.25μm），载气为氦气（纯度为99.99％），流速：1.0 mL/min。升温程序：初始温度50℃，保持2min；以3℃/min的速率升温至180℃#再以lO℃/min的速率升温至230℃，保持10min。进样口温度：250℃，进样量：1.0μL，分流比：20∶1，溶剂延迟6min。质谱条件：电轰击电离（EI）源；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；电离能量：70 eV；传输线温度：280℃；扫描范围（m/z）：40～450；质谱检索图库：NIST谱库。求出正构烷烃C₇～C₃₀保留时间，为下一步计算松针油中各成分保留指数作准备。

根据VandenDool和Kratz的线性程序升温的保留指数原理，利用自编软件求得保留指数（KI）值：