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农兽残检测方法—酶联免疫吸附检测技术-ELISA

基本原理：

使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。

在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。

用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。 

加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。

适用范围：

ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本，干扰小，可以测到每毫升纳克水平的细胞因子（或受体）的水平。

三种必要试剂：

1. 固相的抗原或抗体。

2. 酶标记的抗原或抗体。

3. 酶作用的底物。

红外吸收光谱-IR

基本原理：

当用一束具有连续波长的红外光照射物质时，该物质的分子就要吸收一定波长的红外光能量，并将其转变为分子的振动能和转动能，从而引起分子振动-转动能级跃迁。通过仪器记录下不同波长的透光率（或吸光度）的变化曲线，即是该物质的红外光谱。红外吸收光谱也是一种分子吸收光谱。

红外吸收光谱一般用T~曲线或T~波数曲线表示。纵坐标为百分透射比T%，因而吸收峰向下，向上则为谷；横坐标是波长（单位为µm ），或波数（单位为cm-1）。10000/波数=波长（um）

红外光谱的特点：

优点：1.应用广，提供信息多且具有特征性。

2.不受物体的相态限制  

3.样品用量少，分析速度快，操作简便

局限性：1.不能产生红外吸收的物质无法测定

2.旋光异构体以及不同分子量的同一高聚物无法鉴别

3.谱图上不是所有的峰都能作出理论解释