硒是人体必需的微量元素之一，与人类健康密切相关。硒的生物功能与其硒的形态有着紧密的相关性，不同含量和形态的硒生物活性完全不同，甚至具有毒性。相对于无机硒，有机硒具有毒性小，生物利用度高等特点，被广泛接受。

有机硒主要含硒的氨基酸类有机分子。江西富硒土地丰富，目前在市面上各种富硒产品，特别是富硒大米最为普遍。由于富硒大米价格高，导致存在采用直接人为添加无机硒来获得“富硒”大米，而国家标准中对食品中硒的测定仅限于无机硒的测定，不能对富硒大米中的有机硒进行科学的评价，因此，开展富硒大米中的有机硒形态和含量的分析至关重要，对科学评价和食用富硒大米具有重要意义。

目前对于有机硒的检测方法主要为高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法、高效液相色谱-原子吸收光谱联用，高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱联用法等方法。其中，高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法(HPLC-ICP-MS)由于具有灵敏度高、速度快、线性范围宽等特点，在有机硒元素分析中应用的最为广泛。

本试验采用HPLC-ICP-MS法，通过优化液相色谱和电感耦合等离子体质谱的参数可实现各种有机硒小分子的分离和定量测定。样品的前处理方法对于定量检测至关重要，目前，对不同形态的有机硒的分离提取主要通过酸消解、酶解和直接振荡提取等，强酸条件下易使硒发生形态转变，直接振荡提取又存在提取率不佳的情况，因此本实验采用温和的乙醇回流提取有机硒的方法可减少处理过程中有机硒转化为无机硒的同时，提高提取效率。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1样品来源

普通样品大米购自南昌某大型超市，富硒大米购于江西省宜春富硒地区。

1.1.2主要仪器与试剂

7700X电感耦合等离子体质谱仪(美国Aglient公司)、1260高效液相色谱仪(美国Aglient公司)、HamiltonPRP-X100分析柱和预柱(250mm×4mm、10μm，美国Hamilton)、Milli-Q超纯水仪、电热恒温鼓风干燥箱、旋转蒸发仪。硒代胱氨酸(SeCys2)、L-硒-甲基硒代半胱氨酸(L-SeMc)、硒代蛋氨酸(SeMet)均为高纯试剂，均购自J&KScientific；乙醇为分析纯;试验用水为超纯水(＞18.2MΩ·cm)。

1.2方法

1.2.1样品制备

大米烘干，粉碎过筛后，称取10.0g于100mL烧杯中，加20mL水溶解，调解pH值为6.0~7.5；转移至100mL圆底烧饼中，加入20mL的无水乙醇，回流提取1h，冷却至室温，旋转蒸发除去乙醇，用超纯水定容至25mL，作为有机硒待测液，同时做空白试验。

1.2.2仪器条件

高效液相色谱参数：HamiltonPRP-X100分析柱；流动相为浓度为pH=5.0的柠檬酸铵5mmol/L，其中含2%甲醇，进样量100μL，流速1mL/min。电感耦合等离子体质谱参数见表1。