洋葱是百合科葱属二年生草本植物，是类黄酮含量较高的蔬菜种类之一，别名洋蒜、圆葱、葱头等。它以肥大的肉质鳞茎为产品，根据其皮色可分为红皮、黄皮和白皮等品种。它是世界上重要的蔬菜作物，欧美国家誉之为“菜中皇后”。洋葱具有适应性强、耐贮运、供应期长、产量高、效益好等特点，不仅可以鲜食，而且还是很好的加工原料，已成为我国主要的出口创汇蔬菜之一。

类黄酮是自然界中存在的酚类物质，属植物次级代谢产物。它具有广泛的生物活性和重要的药用价值，对人体健康有重要影响，在防治心脑血管疾病、抗肿瘤、抗自由基、抗氧化、抗过敏、消炎、抗病毒等方面有重要作用。因此生物类黄酮已引起国内外学者的广泛关注，成为研究开发的热点。

类黄酮系色原烷或色原酮的衍生物，其基本骨架具有C6一C3一C6的特点，即由两个芳香环A和B，通过中央三碳链相互连结而成的一系列化合物。其生物合成前体为丙二酰CoA和对香豆酰CoA，由查尔酮合成酶(ChalconeS)，Iltlla∞，CHS)催化二者形成查尔酮，再在查尔酮异构酶催化下，使查尔酮的中央三碳链和氧形成闭合的C环。可见查尔酮合成酶是类黄酮基本骨架形成的第一个关键酶。

1材料与方法

1．1植物材料

以洋葱的新鲜叶片和花为材料，采自山东省农业科学院蔬菜研究所试验基地，取样后迅速放入液氮中冷冻，于一80℃保存备用。

1．2RNA提取

洋葱的总RNA用RNAsimple总RNA提取试剂盒提取，cDNA第一链的合成用1IANScriptRTl完成。

1．3PcR反应

本研究所用的一组引物P1：5’一CATGTCCAAGA7rCAACA’I℃GATGAG一3’和P2：57一CAATCCCG从CGCACCCATTAACA一3’以及另一组引物P3：5’一CAC’rACACTTAAClIG从CCATG，I℃一3’和P4：5’一CCTAACCATC从TGGCCACACT一3’，由博尚生物技术有限公司合成。用灭菌蒸馏水补充至25一。扩增程序：94℃预变性4min；94℃变性30s，58℃退火llnin，72℃延伸lmiIl30s，35个循环；最后72℃保温8min。

1．4目的片段的克隆

扩增产物经l％的琼脂糖凝胶电泳分离，然后在凝胶成像系统上检测并照相记录，分子量从大到小依次为：2000、1000、750、500、250和100bp。PCR扩增产物用凝胶回收试剂盒进行回收，与克隆载体pMDl8一T连接，转化大肠杆菌DH5俚感受态细胞，经蓝白斑筛选和PCR鉴定，将阳性克隆送到博尚生物技术有限公司进行测序。