鲁米诺(luminol)，3-氨基苯二甲酰肼(3-Aminophthalhydrazide)，又名发光氨，是一种常见的化学发光试剂。具有结构简单、价格低廉、易合成、水溶性好和较高的发光量子产率等优点，且又能和多种氧化剂发生化学反应而发光，现在已经成为了应用最普遍的化学发光试剂之一。鲁米诺化学发光体系同时也是研究最为广泛的化学发光体系之一，已经广泛的运用到了各个领域。高效液相色谱(HPLC)具有高效、快速和高分辨能力的特点，在生物化学、生命科学、生物工程、医药、食品及环境等领域得到广泛的应用。采用高效液相色谱法来检测二氧化氮-鲁米诺化学发光体系中的鲁米诺的稳定性，从而探究出在不同保存条件下鲁米诺的稳定性随时间的变化情况，在鲁米诺试剂体系化学发光应用中具有重要的意义。

1实验部分

1.1主要仪器与试剂

1100型高效液相色谱仪、EC-C18型色谱柱(2.7μm，4.6mm×150mm)(美国Agilent公司);CP214型分析天平、STAＲTEＲ2100型酸度计(奥豪斯仪器(上海)有限公司);UPC-22-10T型实验室超纯水器(四川优普超纯科技有限公司);SHZD(Ⅲ)型循环水式真空泵(江苏常州市金坛友联仪器研究所)。鲁米诺试剂(化学纯，美国Sigma-Aldrich公司);甲醇、乙腈(色谱纯，美国ThermoFisher公司);氢氧化钾(分析纯，重庆川东化工(集团)有限公司化学试剂厂);亚硫酸钠(化学纯，成都化学试剂厂);碘化钾(分析纯，天津市福晨化学试剂厂);磷酸氢二钾(K2HPO4)(色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司)。

1.2标准溶液配制

准确称取0.035g鲁米诺试剂溶于100mL(0.5mol/L)氢氧化钾溶液中，配制成鲁米诺储备液。采用鲁米诺储备液分别配制0.0001、0.0005、0.001、0.002、0.003、0.004mol/L鲁米诺标准溶液各5mL。

1.3样品制备及前处理

配制1L(0.002mol/L)鲁米诺体系，分别移入棕色试剂瓶中，每个4mL，共20个。10个常温避光保存，记录对应的存放温度和湿度，另外10个放于冷藏室保存，用于鲁米诺体系中鲁米诺的稳定性测试。进样前试样经过0.45μm滤膜过滤处理。

1.4HPLC条件

鲁米诺标准溶液及其体系的最佳HPLC条件为:1)色谱柱:EC-C18(2.7μm，4.60mm×150mm);2)流速:0.4mL/min;3)流动相:V(水(含0.05mol/L磷酸氢二钾))∶V(甲醇)=60∶40;4)柱温:30℃;5)检测波长:356nm。