总蛋白与乳清蛋白含量是婴幼儿奶粉的重要指标，乳蛋白包括乳清蛋白及酪蛋白，乳清蛋白的主要功能性成分是α-乳白蛋白和β-乳球蛋白。母乳中乳清蛋白和酪蛋白的比例是60∶40，牛、羊乳中的乳清蛋白与酪蛋白的比例约为20∶80。为了使奶粉接近母乳，奶粉生产厂家需要添加符合国家规定的乳清粉或乳清蛋白粉，进而提高婴幼儿对奶粉的吸收率。

我国国家标准GB10765-2010《食品安全国家标准婴儿配方食品》中规定，乳基婴儿配方食品中乳清蛋白含量应≥60%，一般乳清蛋白的测定方法是GB/T5413.2-1997《婴幼儿配方食品和乳粉乳清蛋白的测定》，即凝胶电泳法。凝胶电泳对设备要求较高，AssociationofOfficialAnalyticalChemists（AOAC）标准起草人Wesley建立了通过天冬氨酸（Asx）、丙氨酸（Ala）、苯丙氨酸（Phe）及脯氨酸（Pro）4种氨基酸含量折算乳清蛋白含量的定量方式，计算公式见式（1）。李爽等使用Wesley公式计算婴儿奶粉中乳清蛋白含量，一段奶粉中乳清蛋白含量均≥60%。

为评估我国奶粉的营养状况以及与母乳的接近程度，本文参照食品中氨基酸测定的国家标准方法GB5009.124-2016《食品安全国家标准食品中氨基酸的测定》，采用酸水解法对85种奶粉及2名健康乳母的初乳及成熟乳进行了测试，其中奶粉样品包括69种一段（0～6月龄）牛乳乳基奶粉、5种二段（6～12月龄）牛乳乳基奶粉、4种三段（12月龄以上）牛乳乳基奶粉、6种一段羊乳乳基奶粉及1种二段羊乳乳基奶粉，覆盖19个国内奶粉生产厂家以及2个法国品牌。

国内奶粉生产厂家有：雅贝氏（深圳）乳业有限公司、施恩（中国）婴幼儿营养品有限公司、肇州县摇篮乳业有限责任公司、石家庄君乐宝太行乳业有限公司、西安喜洋洋生物科技有限公司、江西金薄金生态科技有限公司、陕西圣唐秦龙乳业有限公司、深圳恒大母婴用品有限公司、飞鹤（龙江）乳品有限公司、长沙素加营养品有限公司、黑龙江红星集团食品有限公司、合生元（广州）健康产品有限公司、飞鹤（镇赉）乳品有限公司、高培（广州）乳业有限公司、美赞臣营养品（中国）有限公司、雅培（嘉兴）营养品有限公司、西安安诺乳业有限公司、恒大乳业有限公司和惠氏营养品（中国）有限公司。法国品牌包括Nutribio和COOPERATIVEISIGNY-SAINTEMERE。

乳清蛋白含量的计算公式：Pr9.59615.72whey%100%6.1117.037AsxAlaQPheoQQ+=+−=×−−（）（1）式（1）中Asx、Ala、Phe和Pro在本文中分别表示天冬氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸和脯氨酸的含量，whey表示乳清蛋白含量。

1材料与方法

1.1 材料与试剂

四氟乙烯水解管、氮气、氨基酸混标（Sigma）、茚三酮（上海三爱思试剂有限公司）、硼氢化钠（Fluka）及聚氧乙烯十二烷基醚Brij-35（25%）（Sigma）等。

1.2 仪器与设备

高速全自动氨基酸分析仪（日立L-8900，Hitachi）、分析天平（梅特勒，感量：0.001g）、真空干燥箱（VD53，德国Binder）及烘箱（FED53，德国Binder）。

1.3 氨基酸分析测试条件

前处理：称量奶粉0.5g（母乳5g），精确至0.001g，于聚四氟乙烯水解管中，加入15mL6moL·L-1的盐酸溶液及0.5～1g苯酚，充氮，在110℃烘箱中水解22h。冷却后定容，转移200μL于离心小管中，在60℃真空干燥箱内干燥至近干。加入1mL0.02moL·L-1的盐酸溶液，充分溶解后过滤。氨基酸分析仪色谱条件：磺酸型阳离子分离柱，柱温57℃，反应器温度136℃，流动相流速：0.400mL·min-1，衍生液流速：0.350mL·min-1，梯度洗脱。检测器波长：570nm和440nm。