水稻是我国居民的主要粮食作物之一，具有丰富的营养价值，氨基酸含量是衡量大米品质和营养价值的重要指标，但不同产区的大米随着生长环境的不同，氨基酸含量差异也会发生变化。对本地的大米进行氨基酸含量测定，了解其中的氨基酸含量分布特点是十分有必要的。

目前氨基酸的分析主要以色谱分析为主，而高效液相色谱分析需要配合不同的衍生剂进行柱前衍生，加大了实验的操作难度。使用全自动氨基酸分析仪进行分析能够降低衍生操作带来的不确定性，是目前测定氨基酸的经典方法。本研究通过对大米中氨基酸测定方法进行优化，建立了在小容量酸水解管体系中的大米氨基酸测定方法。

1材料与方法

1.1主要材料和仪器

试剂：盐酸（优级纯，上海国药集团化学试剂有限公司）；苯酚（优级纯，上海国药集团化学试剂有限公司）；氨基酸分析仪缓冲液（日本和光纯药工业株式会社）；前三酮溶液（日本和光纯药工业株式会社）。混合氨基酸标准溶液2.5mmol/ml（H本和光纯药工业株式会社）。混合氨基酸标准使用液：取混合氨基酸标准溶液（2.5mmol/ml）1.0ml加入25ml容量瓶中以0.1mol/L盐酸定容至刻度后得100nmol/ml混合氨基酸标准使用液。仪器：氨基酸自动分析仪（日立L-8900）；超声水浴锅（宁波新芝生物科技公司超纯水机（Millipore,美国）。

1.2样品前处理方法

将大米粉碎过50目筛,称取过筛之后的大米0.5g,加人浓盐酸2.0ml,苯酚2?3滴后混匀并抽真空，在水解管保持高真空状态下对玻璃水解管进行玻璃热熔封口，并将完成封口后的水结管放置于110C烘箱中，水解24h后取出冷却至室温,将水解后的样品转移至25ml容量瓶中，用纯水反复清洗水解管后将容量瓶定容至刻度。定容后的样品过0.22ym微孔滤膜后放入进样小瓶中待测。

1.3仪器方法

氨基酸分析仪进行多流动相切换梯度洗脱；反应柱柱温:135C；分离柱柱温：50°C；进样量20M1

2结果与讨论

2.1不同称样量在酸水解条件下的影响

本实验所使用的水解管为抽真空后玻璃热熔封口型水解管,其液体承载量为4.0ml,这就限制了酸水解时盐酸的用量，因此为了使样品能够充分水解且兼顾仪器灵敏度需求，本实验对比了在称样量0.1-1.Og间称样量的变化而体现出的酸水解效果的不同，见表1。结果显示在称样量为o.lg与0.2g时虽然能够达到完全水解•但称样量过低同时也损失了仪器的灵敏度，而称样量在1.0g时已经无法达到完全水解的要求，因此在兼顾水解效率与灵敏度的要求上选择了0.5g为本实验的最理性称样量。