北方伟业计量集团有限公司
氨基甲酸乙酯(EthylCarbamate,EC)又名尿烷(Urethane),是一种在食品发酵和储藏过程中会自然生成的污染物,据动物实验都证明了其对肺癌、淋巴癌、肝癌和皮肤癌等疾病有潜在致癌风险。大部分发酵食品均存在EC的污染,食品添加剂联合专家委员会评估从酒精饮料中的EC平均摄入量是80ng/kg体重·d,虽未超过致癌较低置信区间基准剂量的0.3mg/kg体重·d,但酒精饮料中EC含量已经足够引起相关部门重视[7-8]。2007年欧洲食品安全管理局的报告,人类在食物中摄入的EC约17ng/kg体重·d,如饮酒则可达到65ng/kg体重·d。
目前,真菌毒素和EC都被视为食品安全中的重要问题,我国暂时参照加拿大的国际限量标准对EC进行控制,尚未制定有关EC的强制性标准。白酒是我国传统的蒸馏酒,也是我国特有的传统酒种,具有独特的工艺和风格,以其优异的色、香、味、格受到广大饮用者的喜爱,白酒中氨基甲酸乙酯检测准确性直接关乎消费者身体健康。虽然我国目前未制定白酒中有关氨基甲酸乙酯的强制性标准,但是氨基甲酸乙酯的问题已经引起了厂家和消费者的普遍关注。
白酒的传统工艺源远流长,酿造过程中使用多种原料辅料,其中部分含氮化合物会生成氨基甲酸乙酯前体物质继而被微生物转化为氨基甲酸乙酯,进入白酒中会造成潜在的食品安全风险,因此选取采用灵敏度高、检测限低、实用性强的检测方法对酒企以及食品安全部门都异常重要。早期的用于检测EC的气相色谱分析法与傅里叶变换红外光谱法稳定性较差且检出限较高,本研究建立、使用稳定性和检出限均较为理想的HPLC与GC-MS检测分析方法,对两种方法的优劣进行对比,明确两种方法的准确性和适用范围,期望对我国氨基甲酸乙酯的相关标准制定提供参考依据。
1材料与方法
1.1材料、试剂及仪器
酒样:本公司白酒产品,两款。试剂:EC标准品(CAS:51-79-6,纯度99.50%),ChemService公司;D5-氨基甲酸乙酯(CAS:73962-07-9),ChemService公司;9-羟基占吨,分析纯;无水硫酸钠,分析纯;氯化钠,分析纯;正己烷,色谱纯;乙醚,色谱纯;乙腈,色谱纯;甲醇,色谱纯。仪器设备:Agilent高效液相色谱仪,美国安捷伦公司;Agilent7890A-7000B三重四级杆串联气质联用仪,美国安捷伦公司;无水硫酸钠小柱(2g,6mL),AN-PELLaboratoryTechnology公司;OA-SYS氮吹仪,上海安谱公司。
1.2高效液相色谱(HPLC)方法
1.2.1样品处理准确吸取1.0mL酒样于试管中,加入100μL1.5mol/L盐酸溶液、600μL0.02mol/L9-羟基占吨溶液,混匀,室温下避光衍生60min,经0.22μm有机滤膜过滤,滤液用于液相色谱测定。
1.2.2色谱条件(1)色谱柱:C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)或等效色谱柱。(2)柱温:30℃。(3)激发波长:233nm,发射波长:600nm。(4)流速:0.8mL/min。(5)进样体积:20μL。(6)高效液相色谱洗脱条件(表1)。
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