腺苷钴胺片是维生素类药物，可被人体直接吸收利用，活性强，与组织细胞亲和力强，排泄较慢，主要用于巨幼红细胞性贫血、营养不良性贫血、妊娠期贫血，亦用于神经性疾患如多发性神经炎、神经根炎、三叉神经痛、坐骨神经痛、神经麻痹等的治疗。腺苷钴胺片系2005年版《中国药典(二部)》收载品种，其中含量测定方法是紫外分光光度法比色法，操作烦琐，还使用剧毒氰化钾，对人体危害很大，误差也大。为此，笔者用高效液相色谱法测定该品种含量，报道如下。

1仪器与试药

安捷伦1100型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)。腺苷钴胺对照品(中国药品生物制品检定所，批号为140658—200501)；腺苷钴胺片(市售品)；乙腈(色谱纯)，磷酸、磷酸二氢钾(分析纯)，水(高纯水)。

2方法与结果

2．1色谱条件

色谱柱：InertsilODS一3柱(250mm×4．6mm，5txm)；流动相：乙腈一0．05mol／L磷酸二氢钾溶液(15：85，用磷酸调pH至3．2)；检测波长：260am；流速：1．0mL／min；柱温：室温；进样量：20IxL。在此条件下，色谱图见图1。

2．2方法学考察

专属性试验：在上述色谱条件下，空白溶剂在腺苷钴胺位置无吸收峰，表明溶剂对测定无干扰。按照模拟处方，配制不含主药的溶液，同法测定。结果显示，辅料在此色谱条件下有吸收峰，但不干扰腺苷钴胺主峰的测定。腺苷钴胺对照品经酸、碱、氧化、光照、高温破坏所产生的降解产物能与主成分的色谱峰完全分离(典型光谱见图2。

线性关系考察：取腺苷钴胺对照品，用水溶解并稀释成20，50，100，200，300，400，500Ixg／mL的溶液，并依法测定含量。以腺苷钴胺质量浓度(p,g／mL)为横坐标(C)、腺苷钴胺的峰面积为纵坐标(A)绘制标准曲线。标准曲线A=8．79736C+4．2022，r=0．9999(n=7)。结果表明，腺苷钴胺质量浓度在20～500t~g／mL范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：取对照品溶液，照含量测定项下方法重复进样6次，测定峰面积。结果的RSD为0．17％(n=6)。稳定性试验：取同一供试品溶液，室温下放置，分别于0，2，4，8，12h时取样测定峰面积。结果的RSD为0．29％，表明12h内供试品溶液稳定。