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磷酸酶是土壤中广泛存在的一种水解酶，能够催化磷酸酯的水解反应，包括磷酸单酯酶、磷酸二酯酶、三磷酸单酯酶等。其中，磷酸单酯酶由于与有机磷的矿化及植物的磷素营养关系密切，因此是研究最多的磷酸酶。磷酸单酯酶又基于其反应的最适pH值，分为酸性(pH5～pH6)和碱性磷酸酶(pH8～pH10)。磷酸单酯酶能够催化β-甘油磷酸酯、苯磷酸酯、β-蔡磷酸酯、硝基苯磷酸酯等的水解。磷酸根的存在对磷酸单酯酶的活性有竞争抑制作用。此外，重金属和微量元素也抑制磷酸单酯酶的活性。
测定磷酸单酯酶活性的方法有很多，这些方法的区别主要体现在所用的底物不同，以及由此产生的测定水解产物的方法各异。目前常用的是用对硝基苯磷酸脂法测定磷酸单酯酶的活性，用双对硝基苯磷酸脂法测定磷酸二酯酶的活性。
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